Gå direkte til indholdet
Hep-55.1C
Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom
Synonymer
HEP-55.1C, 55.1C

Dokumenter

Hep-55.1C

Cell line · Varenummer 400201

The Hep-55.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by its ...

€800.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

Hep-55.1c hepatomcellelinjen stammer fra en muselevertumor, specifikt fra C57BL/6J-musestammen. Denne cellelinje er karakteriseret ved sin hepatocytiske oprindelse, som er bekræftet gennem analyse af intermediære filamentproteiner. Hep-55.1c udtrykker simple keratiner K8 og K18, som er typiske for normale leverceller, samt vimentin og keratin K19 i varierende grad. Disse proteinmønstre bekræfter cellelinjens hepatocytiske natur og dens klassificering som en hepatomlinje.

Hep-55.1c-cellelinjen udviser en overvejende epitelial morfologi, hvilket afspejler dens oprindelse fra hepatocytter. Denne morfologiske fænotype stemmer overens med dens proteinekspressionsprofil. DNA-fingeraftryksanalyse af Hep-55.1c afslørede ingen større strukturelle abnormiteter, hvilket indikerer en grad af genomisk stabilitet. Der blev dog observeret nogle ændringer i de relative intensiteter af specifikke bånd med stigende antal passager, hvilket tyder på mindre genomisk variation over længere kulturperioder.

På trods af fraværet af påviselige p53-mutationer i de primære muselevertumorer blev der fundet afvigelser i nogle hepatomlinjer under in vitro-opformering. Hep-55.1c-cellelinjen blev analyseret for mutationer i p53- og c-Ha-ras-generne. Fraværet af påviselige mutationer i p53-genet i denne linje under tidlige passager tyder på en stabil genetisk baggrund. Denne cellelinje fungerer som en værdifuld model til undersøgelse af hepatocellulært karcinom og giver indsigt i de cellulære og molekylære mekanismer, der ligger til grund for leverens tumorigenese.

Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom
Synonymer
  • HEP-55.1C
  • 55.1C

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i C57BL/6J-mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
Hep-55.1C (Cytion katalognummer 400201)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_5766

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
Keratin 8, Keratin 18, Vimentin.
Mutationsprofil
P53 wt

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
Hver 3. til 5. dag
Genopretning efter optøning
Start dyrkningen fra kryorør ved en celletæthed på 3 til 4 x 104 celler/cm2. Cellerne vil genoprette sig inden for 24 til 48 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
C57BL/6J
Donorens alder
Voksen