Tartalomra ugrás
Hep-55.1C
Szövet
Máj
Betegség
Hepatocelluláris karcinóma
Szinonimák
HEP-55.1C, 55.1C

Dokumentumok

Hep-55.1C

Cell line · Termékszám 400201

The Hep-55.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by its ...

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A Hep-55.1c hepatóma sejtvonal egér májtumorból származik, kifejezetten a C57BL/6J egértörzsből. Ezt a sejtvonalat a hepatocita eredet jellemzi, amit az intermedier filamentum fehérje analízisével igazoltak. A Hep-55.1c expresszálja a normális májsejtekre jellemző K8 és K18 egyszerű keratinokat, valamint különböző mértékben a vimentint és a K19 keratint. Ezek a fehérjemintázatok megerősítik a sejtvonal hepatocita jellegét és hepatóma vonalnak való besorolását.

A Hep-55.1c sejtvonal túlnyomórészt epiteliális morfológiát mutat, ami a hepatocitákból való származását tükrözi. Ez a morfológiai fenotípus összhangban van a fehérjeexpressziós profiljával. A Hep-55.1c DNS-ujjlenyomat-elemzése nem mutatott ki jelentős szerkezeti eltéréseket, ami bizonyos fokú genomikai stabilitásra utal. Ugyanakkor bizonyos sávok relatív intenzitásának változásait figyeltük meg a növekvő passzázsszámmal, ami kisebb genomiális variabilitásra utal a hosszabb tenyésztési időszakok alatt.

Annak ellenére, hogy a primer egér májtumorokban nem voltak kimutatható p53 mutációk, néhány hepatoma vonalban in vitro szaporítás során aberrációkat találtak. A Hep-55.1c sejtvonalat elemezték a p53 és a c-Ha-ras gének mutációi szempontjából. A p53 gén kimutatható mutációinak hiánya ebben a vonalban a korai passzázsok során stabil genetikai háttérre utal. Ez a sejtvonal értékes modellként szolgál a hepatocelluláris karcinóma tanulmányozására, betekintést nyújtva a máj tumorigenezisének hátterében álló sejtes és molekuláris mechanizmusokba.

Szövet
Máj
Betegség
Hepatocelluláris karcinóma
Szinonimák
  • HEP-55.1C
  • 55.1C

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Igen, C57BL/6J egerekben

04Azonosítók

Hivatkozás
Hep-55.1C (Cytion katalógusszám 400201)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_5766

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
Keratin 8, Keratin 18, Vimentin.
Mutációs profil
P53 wt

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
3-5 naponta
Az olvadás utáni helyreállás
Kezdje el a tenyésztést a kriovialból 3–4 x 104 sejt/cm2 sejtsűrűséggel. A sejtek 24–48 órán belül helyreállnak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
C57BL/6J
Az adományozó életkora
Felnőtt