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Hep-55.1C
ティッシュ
肝臓
病気
肝細胞癌
同義語
HEP-55.1C, 55.1C

Hep-55.1C

Cell line · 製品番号 400201

The Hep-55.1c hepatoma cell line is derived from a mouse liver tumor, specifically from the C57BL/6J mouse strain. This cell line is characterized by its ...

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01概要

説明

Hep-55.1c肝細胞株はマウスの肝腫瘍、特にC57BL/6Jマウス系統に由来する。この細胞株は、中間フィラメントタンパク質の分析によって確認された肝細胞由来であることが特徴である。Hep-55.1cは、正常肝細胞に典型的な単純ケラチンK8とK18、また程度の差はあるがビメンチンとケラチンK19を発現している。これらのタンパク質パターンは、この細胞株の肝細胞性、および肝腫瘍株としての分類を裏付けるものである。

Hep-55.1c細胞株は、肝細胞に由来することを反映して、主に上皮性の形態を示す。この形態学的表現型はそのタンパク質発現プロファイルと一致している。Hep-55.1cのDNAフィンガープリント解析では、大きな構造異常は見られず、ゲノムはある程度安定していることが示された。しかしながら、継代数の増加に伴って特定のバンドの相対的強度に若干の変化が観察されたことから、長期間の培養によるゲノムの変動は軽微であることが示唆された。

マウスの原発性肝腫瘍では検出可能なp53変異がないにもかかわらず、いくつかの肝腫瘍株ではin vitro増殖中に異常が認められた。Hep-55.1c細胞株はp53とc-Ha-ras遺伝子の突然変異について分析された。この細胞株では初期継代中にp53遺伝子に検出可能な変異がないことから、遺伝的背景が安定していることが示唆された。この細胞株は肝細胞癌を研究するための貴重なモデルであり、肝腫瘍形成の根底にある細胞的、分子的メカニズムについての洞察を与えてくれる。

ティッシュ
肝臓
病気
肝細胞癌
同義語
  • HEP-55.1C
  • 55.1C

02分類

生物
マウス
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
はい、C57BL/6Jマウスにおいて

04識別子

引用
Hep-55.1C(Cytion カタログ番号 400201)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_5766

05発現と感受性

タンパク質の発現
ケラチン8、ケラチン18、ビメンチン。
変異プロファイル
P53 wt

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
3~5日ごと
解凍後の回復
クライオバイアルから培養を開始し、細胞密度を3~4×10⁴細胞/cm²に調整する。細胞は24~48時間以内に回復する。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
C57BL/6J
ドナーの年齢
アダルト