C666-1

A linhagem celular C666-1 é derivada do carcinoma nasofaríngeo (NPC) e se destaca por manter consistentemente o vírus de Epstein-Barr (EBV) em suas células. Essa característica torna a C666-1 um modelo essencial para o estudo do NPC associado ao EBV, uma vez que a infecção pelo EBV é prevalente em casos de NPC, particularmente entre pacientes do Sudeste Asiático. A linha celular foi originalmente estabelecida a partir de um xenoenxerto tumoral de NPC indiferenciado, derivado de um paciente de origem do sul da China. As células C666-1 exibem padrões de latência II do EBV, incluindo a expressão de proteínas virais como EBNA1, LMP1 e LMP2, que estão implicadas na patogênese do NPC e na progressão tumoral. Essas células são tumorigênicas quando implantadas em camundongos imunocomprometidos e crescem como culturas aderentes sem inibição de contato, o que indica seu fenótipo cancerígeno agressivo.

Pesquisas utilizando as células C666-1 esclareceram o papel do EBV no NPC, especialmente as funções das proteínas virais que impulsionam a oncogênese. Estudos demonstraram que o direcionamento às proteínas de latência do EBV, como a LMP1, por meio de DNAzimas clivadoras de RNA ou inibidores, pode suprimir o crescimento tumoral, reduzir a proliferação e induzir a apoptose nas células C666-1. Além disso, compostos como a nobiletina e inibidores de miRNA que têm como alvo vias celulares (por exemplo, as vias de sinalização PARP-2/SIRT1/AMPK e STAT3) demonstram potencial eficácia terapêutica ao inibir a proliferação celular e promover a apoptose. Essas descobertas ressaltam a utilidade das células C666-1 como modelo de pesquisa para o desenvolvimento de terapias que tenham como alvo específico os mecanismos moleculares relacionados ao EBV no NPC.

As células C666-1 servem como um valioso sistema in vitro e in vivo para compreender a influência do EBV na biologia tumoral e para avaliar terapias antivirais e anticâncer direcionadas às vias reguladas pelo EBV. A expressão estável, por essa linhagem celular, do RNA codificado pelo EBV (EBER), de marcadores epiteliais como a citoqueratina e de alterações genéticas características do NPC reforça ainda mais sua relevância para a pesquisa translacional em terapêuticas para o NPC.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.