C666-1

A linha celular C666-1 é derivada do carcinoma nasofaríngeo (NPC) e caracteriza-se pela retenção consistente do vírus de Epstein-Barr (EBV) no interior das suas células. Esta característica torna a C666-1 um modelo fundamental para o estudo do NPC associado ao EBV, uma vez que a infeção pelo EBV é prevalente nos casos de NPC, particularmente entre doentes do Sudeste Asiático. A linha celular foi originalmente estabelecida a partir de um xenoenxerto tumoral de NPC indiferenciado, proveniente de um doente originário do sul da China. As células C666-1 apresentam padrões de latência II do EBV, incluindo a expressão de proteínas virais como a EBNA1, a LMP1 e a LMP2, que estão implicadas na patogénese do NPC e na progressão tumoral. Estas células são tumorigénicas quando implantadas em ratos imunocomprometidos e crescem como culturas aderentes sem inibição de contacto, o que é indicativo do seu fenótipo cancerígeno agressivo.

A investigação com as células C666-1 esclareceu o papel do EBV no NPC, especialmente as funções das proteínas virais que impulsionam a oncogénese. Estudos demonstraram que o alvo nas proteínas de latência do EBV, como a LMP1, com DNAzimas de clivagem de RNA ou inibidores, pode suprimir o crescimento tumoral, reduzir a proliferação e induzir a apoptose nas células C666-1. Além disso, compostos como a nobiletina e os inibidores de miRNA que atuam em vias celulares (por exemplo, as vias de sinalização PARP-2/SIRT1/AMPK e STAT3) demonstram potencial eficácia terapêutica ao inibirem a proliferação celular e promoverem a apoptose. Estas descobertas sublinham a utilidade das células C666-1 como modelo de investigação para o desenvolvimento de terapias que visem especificamente os mecanismos moleculares relacionados com o EBV no NPC.

As células C666-1 constituem um valioso sistema in vitro e in vivo para compreender a influência do EBV na biologia tumoral e para avaliar terapias antivirais e anticancerígenas direcionadas para vias reguladas pelo EBV. A expressão estável, por parte desta linha celular, de RNA codificado pelo EBV (EBER), de marcadores epiteliais como a citoqueratina e de alterações genéticas características do NPC reforça ainda mais a sua relevância para a investigação translacional no âmbito das terapêuticas para o NPC.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia