Pāriet uz saturu
C666-1
Audums
Nazofaringa
Slimība
Nazofaringeālā karcinoma
Sinonīmi
c666-1, C6661

Dokumenti

C666-1

Cell line · Preces numurs 305512

Šūnu līnija C666-1 ir iegūta no nazofaringeālās karcinomas (NPC) un izceļas ar to, ka tajā pastāvīgi saglabājas Epšteina-Barra vīruss (EBV)...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Šūnu līnija C666-1 ir iegūta no nazofaringeālās karcinomas (NPC) un izceļas ar to, ka tās šūnās pastāvīgi saglabājas Epšteina-Barra vīruss (EBV). Šī īpašība padara C666-1 par būtisku modeli EBV saistītās NPC izpētei, jo EBV infekcija ir izplatīta NPC gadījumos, jo īpaši pacientiem Dienvidaustrumāzijā. Šūnu līnija sākotnēji tika izveidota no nediferencēta NPC audzēja ksenotransplantāta, kas iegūts no pacienta, kura izcelsme ir Ķīnas dienvidos. C666-1 šūnas parāda EBV latences II raksturīgās pazīmes, tostarp tādu vīrusu proteīnu ekspresiju kā EBNA1, LMP1 un LMP2, kas ir saistīti ar NPC patogēnēzi un audzēja progresēšanu. Šīs šūnas ir tumorogēnas, ja tās implantē imūndeficītiem pelēm, un aug kā adhezīvas kultūras bez kontakta inhibīcijas, kas liecina par to agresīvo vēža fenotipu.

Pētījumi, izmantojot C666-1 šūnas, ir atklājuši EBV lomu NPC, īpaši to vīrusu proteīnu funkcijas, kas veicina onkogēnēzi. Pētījumi ir parādījuši, ka, iedarbojoties uz EBV latences proteīniem, piemēram, LMP1, ar RNS šķeļošiem DNS-enzīmiem vai inhibitoriem, var nomākt audzēja augšanu, samazināt proliferāciju un izraisīt apoptozi C666-1 šūnās. Turklāt tādi savienojumi kā nobiletīns un miRNA inhibitori, kas vērsti pret šūnu signālceļiem (piemēram, PARP-2/SIRT1/AMPK un STAT3 signālceļiem), parāda potenciālu terapeitisko efektivitāti, inhibējot šūnu proliferāciju un veicinot apoptozi. Šie atklājumi uzsver C666-1 lietderību kā pētniecības modeli terapiju izstrādei, kas specifiski vērstas uz EBV saistītiem molekulāriem mehānismiem NPC.

C666-1 šūnas kalpo kā vērtīga in vitro un in vivo sistēma, lai izprastu EBV ietekmi uz audzēja bioloģiju un novērtētu pretvīrusu un pretvēža terapijas, kas vērstas uz EBV vadītajiem signālceļiem. Šīs šūnu līnijas stabilā EBV kodētā RNS (EBER) ekspresija, epitēlija marķieri, piemēram, citocheratīns, un NPC raksturīgās ģenētiskās izmaiņas vēl vairāk palielina tās nozīmi translacionālajos pētījumos par NPC terapiju.

Audums
Nazofaringa
Slimība
Nazofaringeālā karcinoma
Sinonīmi
  • c666-1
  • C6661

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Identifikatori

Atsauce
C666-1 (Cytion kataloga numurs 305512)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_7949

04Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Transformants: EBV

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
Nav norādīts
Etniskā piederība
Ķīniešu