Siirry sisältöön
C666-1
Kudos
nenänielu
Sairaus
Nenänielun syöpä
Synonyymit
c666-1, C6661

Asiakirjat

C666-1

Cell line · Tuotenumero 305512

C666-1-solulinja on peräisin nenänielun karsinoomasta (NPC), ja se on ainutlaatuinen siinä, että Epstein-Barr-virus (EBV) säilyy sen soluissa jatkuvasti...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

C666-1-solulinja on peräisin nenänielun karsinoomasta (NPC), ja se on ainutlaatuinen sen vuoksi, että sen soluissa säilyy jatkuvasti Epstein-Barr-virus (EBV). Tämä ominaisuus tekee C666-1:stä keskeisen mallin EBV:hen liittyvän nenänielun karsinooman tutkimuksessa, sillä EBV-infektio on yleistä nenänielun karsinoomatapauksissa, erityisesti Kaakkois-Aasian potilaiden keskuudessa. Solulinja perustettiin alun perin erilaistumattomasta nenänielun karsinooman ksenotransplantaatista, joka oli peräisin eteläkiinalaiselta potilaalta. C666-1-soluissa esiintyy EBV:n latenssi II -kuvioita, mukaan lukien sellaisten virusproteiinien ilmentyminen kuin EBNA1, LMP1 ja LMP2, joiden tiedetään liittyvän NPC:n patogeneesiin ja kasvaimen etenemiseen. Nämä solut ovat tuumorigeenisiä, kun ne istutetaan immuunipuutteisiin hiiriin, ja ne kasvavat kiinnittyneinä viljelminä ilman kontaktiestettä, mikä viittaa niiden aggressiiviseen syöpäfenotyyppiin.

C666-1-soluja hyödyntävä tutkimus on valottanut EBV:n roolia NPC:ssä, erityisesti syövän syntyä edistävien virusproteiinien toimintaa. Tutkimukset ovat osoittaneet, että EBV:n latenssiproteiinien, kuten LMP1:n, kohdentaminen RNA:ta pilkkovilla DNA-entsyymeillä tai estäjillä voi hillitä kasvaimen kasvua, vähentää solujen lisääntymistä ja indusoida apoptoosia C666-1-soluissa. Lisäksi nobiletiinin kaltaiset yhdisteet sekä solureitteihin (esim. PARP-2/SIRT1/AMPK- ja STAT3-signalointireitteihin) kohdistuvat miRNA-inhibiittorit osoittavat potentiaalista terapeuttista tehoa estämällä solujen proliferaatiota ja edistämällä apoptoosia. Nämä havainnot korostavat C666-1-solujen hyödyllisyyttä tutkimusmallina kehitettäessä hoitoja, jotka kohdistuvat spesifisesti EBV:hen liittyviin molekyylimekanismeihin nenänielun syövässä (NPC).

C666-1-solut toimivat arvokkaana in vitro- ja in vivo -järjestelmänä EBV:n vaikutuksen ymmärtämiseksi kasvaimen biologiassa sekä EBV:n ohjaamiin reitteihin kohdistuvien antiviraalisten ja syöpälääkehoitojen arvioimiseksi. Solulinjan vakaa EBV:n koodaaman RNA:n (EBER), sytokeratiinin kaltaisten epiteelimarkkerien sekä NPC:lle tyypillisten geneettisten muutosten ilmentyminen lisää entisestään sen merkitystä translaatiotutkimuksessa NPC-hoitojen kehittämisessä.

Kudos
nenänielu
Sairaus
Nenänielun syöpä
Synonyymit
  • c666-1
  • C6661

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Bioturvallisuustaso
2

03Tunnisteet

Lähdeviite
C666-1 (Cytionin tuotenumero 305512)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_7949

04Ilmentyminen ja alttius

Virukset
Muuntaja: EBV

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
Määrittelemätön
Etnisyys
Kiinalainen