الانتقال إلى المحتوى
V79-GalK1
الأنسجة
الرئة
المرض
خلايا ليفية رئوية طبيعية (تعاني من نقص الجالاكتوكيناز؛ مشتق من V79 تم إحداث طفرة فيه بواسطة EMS؛ مقاومة لـ 2-ديوكسيجالاكتوز و8-أزاغوانين)
موقع الانتشار
لا ينطبق (سلسلة خلايا الأرومة الليفية الرئوية للهامستر الصيني؛ وليست عينة ورمية)

المستندات

V79-GalK1

Cell line · رقم المنتج 305011

هذا الخط الخلوي هو مشتق استنساخي من خلايا V79 التي عولجت بميثان سلفونات الإيثيل. تعاني هذه الخلايا من نقص في إنزيم الجالاكتوكيناز وتكون مقاومة...

€420.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
هذا الخط الخلوي هو مشتق استنساخي من خلايا V79 التي عولجت بميثان سلفونات الإيثيل. تعاني هذه الخلايا من نقص في إنزيم الجالاكتوكيناز، كما أنها مقاومة لـ 2-ديوكسيجالاكتوز و8-أزاغوانين.
الأنسجة
الرئة
المرض
خلايا ليفية رئوية طبيعية (تعاني من نقص الجالاكتوكيناز؛ مشتق من V79 تم إحداث طفرة فيه بواسطة EMS؛ مقاومة لـ 2-ديوكسيجالاكتوز و8-أزاغوانين)
موقع الانتشار
لا ينطبق (سلسلة خلايا الأرومة الليفية الرئوية للهامستر الصيني؛ وليست عينة ورمية)
التطبيقات
أبحاث الطفرات؛ علم السموم الجينية؛ اختبارات السمية الجينية؛ دراسات التكامل في حالات نقص الجالاكتوكيناز؛ علم الوراثة للخلايا الأبوية V79 التي تعاني من نقص HPRT؛ مقارنات بين نموذجي CHO وV79؛ أبحاث إصلاح الحمض النووي

02التصنيف

كائن حي
الهامستر الصيني
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
خالية من الكائنات المعدلة وراثيًا
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
No genetic modification (mutagenesis by EMS is a chemical mutagen treatment, not stable transgene introduction); carries galactokinase deficiency and 8-azaguanine resistance arising from endogenous mutations
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الأرومة الليفية الشبيهة بالأرومة الليفية
نوع الخلية
الأرومة الليفية
النمط الكروموسومي
2n=22
زمن المضاعفة
حوالي 14 إلى 18 ساعة (مستمد من V79؛ تضاعف سريع)

04المعرّفات

المرجع
V79-GalK1 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305011)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10029
سيلوصور
CVCL_2989

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 5
كثافة البذر
2-4*10^4/سم²
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

الأصل العرقي
لا ينطبق (سلسلة خلايا الهامستر الصيني)