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V79-GalK1
Tessuto
Polmone
Malattia
Fibroblasto polmonare normale (carente di galattochinasi; derivato V79 mutagenizzato con EMS; resistente al 2-desossigalattosio e all’8-azaguanina)
Sito metastatico
Non applicabile (linea cellulare di fibroblasti polmonari di criceto cinese; non si tratta di un campione tumorale)

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V79-GalK1

Cell line · Codice prodotto 305011

Questa linea cellulare è un derivato clonale delle cellule V79 che erano state trattate con etilmetansolfonato. Le cellule presentano una carenza di galattochinasi e sono resistenti...

€420.00IVA e spese di spedizione escluse

Personalizzazione / Suggerimenti

Disponibile
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01Informazioni generali

Descrizione
Questa linea cellulare è un derivato clonale delle cellule V79 trattate con etilmetanesulfonato. Le cellule sono carenti di galattochinasi e sono resistenti al 2-deossigalattosio e alla 8-azaguanina.
Tessuto
Polmone
Malattia
Fibroblasto polmonare normale (carente di galattochinasi; derivato V79 mutagenizzato con EMS; resistente al 2-desossigalattosio e all’8-azaguanina)
Sito metastatico
Non applicabile (linea cellulare di fibroblasti polmonari di criceto cinese; non si tratta di un campione tumorale)
Applicazioni
Ricerca sulle mutazioni; tossicologia genetica; test di genotossicità; studi di complementazione del deficit di galattochinasi; genetica del genitore V79 con deficit di HPRT; confronti tra i modelli CHO e V79; ricerca sulla riparazione del DNA

02Classificazione

Organismo
Criceto cinese
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Presenza di OGM
Senza OGM
Dettagli sullo stato degli OGM
No genetic modification (mutagenesis by EMS is a chemical mutagen treatment, not stable transgene introduction); carries galactokinase deficiency and 8-azaguanine resistance arising from endogenous mutations
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile a un fibroblasto
Tipo di cellula
Fibroblasti
Cariotipo
2n=22
Tempo di raddoppio
circa 14-18 ore (dati derivati dal ceppo V79; raddoppio rapido)

04Identificatori

Riferimento bibliografico
V79-GalK1 (codice catalogo Cytion 305011)
Codice fiscale NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_2989

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rapporto di frazionamento
Da 1 a 5
Densità di semina
2-4*10^4/cm²
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Etnia
Non applicabile (linea cellulare di criceto cinese)