Gå direkt till innehållet
V79-GalK1
Vävnad
Lungan
Sjukdom
Normal lungfibroblast (med brist på galaktokinas; EMS-mutageniserat V79-derivat; resistent mot 2-deoxigalaktos och 8-azaguanin)
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (cellinje av lungfibroblaster från kinesisk hamster; inte ett tumörprov)

Dokument

V79-GalK1

Cell line · Produktnummer 305011

Denna cellinje är en klonal avledning av V79-celler som har behandlats med etylmetansulfonat. Cellerna saknar galaktokinas och är resistenta...

€420.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning
Denna cellinje är ett klonalt derivat av V79-celler som har behandlats med etylmetansulfonat. Cellerna har brist på galaktokinas och är resistenta mot 2-deoxygalaktos och 8-azaguanin.
Vävnad
Lungan
Sjukdom
Normal lungfibroblast (med brist på galaktokinas; EMS-mutageniserat V79-derivat; resistent mot 2-deoxigalaktos och 8-azaguanin)
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (cellinje av lungfibroblaster från kinesisk hamster; inte ett tumörprov)
Ansökningar
Mutationsforskning; genetisk toxikologi; genotoxicitetsundersökningar; studier av komplementering vid galaktokinasbrist; genetik hos HPRT-defekt föräldercell V79; jämförelser mellan CHO- och V79-modeller; forskning om DNA-reparation

02Klassificering

Organism
Kinesisk hamster
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
Utan genetiskt modifierade organismer
Detaljer om GMO-status
No genetic modification (mutagenesis by EMS is a chemical mutagen treatment, not stable transgene introduction); carries galactokinase deficiency and 8-azaguanine resistance arising from endogenous mutations
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblast-liknande
Celltyp
Fibroblast
Karyotyp
2n=22
Fördubblingstid
ca 14–18 timmar (baserat på V79; snabb fördubbling)

04Identifierare

Källa
V79-GalK1 (Cytion-katalognummer 305011)
NCBI-skattenummer
10029
Cellosaurus
CVCL_2989

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Uppdelningsförhållande
1 till 5
Såtäthet
2–4 × 10⁴/cm²
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Etnicitet
Ej tillämpligt (cellinje från kinesisk hamster)