Siirry sisältöön
V79-GalK1
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Normaali keuhkofibroblastti (galaktokinaasipuutteinen; EMS-mutagenoitu V79-johdannainen; resistentti 2-deoksigalaktoosille ja 8-atsaguaninille)
Metastaasikohde
Ei sovelleta (kiinalaisen hamsterin keuhkofibroblasttisolulinja; ei kasvainnäyte)

Asiakirjat

V79-GalK1

Cell line · Tuotenumero 305011

Tämä solulinja on etyylimetaanisulfonaatilla käsiteltyjen V79-solujen klonaalinen johdannainen. Soluilla on galaktokinasipuutos, ja ne ovat resistenttejä...

€420.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus
Tämä solulinja on etyylimetaanisulfonaatilla käsiteltyjen V79-solujen klonaalinen johdannainen. Soluilla on galaktokinasipuutos, ja ne ovat resistenttejä 2-deoksigalaktoosille ja 8-atsaguaninille.
Kudos
Keuhkot
Sairaus
Normaali keuhkofibroblastti (galaktokinaasipuutteinen; EMS-mutagenoitu V79-johdannainen; resistentti 2-deoksigalaktoosille ja 8-atsaguaninille)
Metastaasikohde
Ei sovelleta (kiinalaisen hamsterin keuhkofibroblasttisolulinja; ei kasvainnäyte)
Sovellukset
Mutaatiotutkimus; geneettinen toksikologia; genotoksisuustestaus; galaktokinaasin puutoksen komplementaatiotutkimukset; HPRT-puutteisen V79-vanhemman genetiikka; CHO/V79-mallien vertailut; DNA:n korjaustutkimus

02Luokittelu

Organismi
kiinalainen hamsteri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-vapaa
GMO-statuksen tiedot
No genetic modification (mutagenesis by EMS is a chemical mutagen treatment, not stable transgene introduction); carries galactokinase deficiency and 8-azaguanine resistance arising from endogenous mutations
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Fibroblastit
Karyotyyppi
2n = 22
Kaksinkertaistumisaika
noin 14–18 tuntia (V79-peräinen; nopea kaksinkertaistuminen)

04Tunnisteet

Lähdeviite
V79-GalK1 (Cytionin tuotenumero 305011)
NCBI-verotunnus
10029
Cellosaurus
CVCL_2989

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–5
Kylvötiheys
2–4 × 10⁴/cm²
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

07Lahjoittaja

Etnisyys
Ei sovelleta (kiinalaisen hamsterin solulinja)