Prejsť na obsah
V79-GalK1
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Normálny pľúcny fibroblast (s deficitom galaktokinázy; derivát V79 mutovaný metódou EMS; rezistentný voči 2-deoxygalaktóze a 8-azaguanínu)
Miesto metastáz
Neplatí (bunka z pľúcneho fibroblastu čínskeho škrečka; nejde o vzorku nádoru)

Dokumenty

V79-GalK1

Cell line · Číslo výrobku 305011

Táto bunková línia je klonálnym derivátom buniek V79, ktoré boli ošetrené etylmetánsulfonátom. Tieto bunky vykazujú deficit galaktokinázy a sú rezistentné...

€420.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis
Táto bunková línia je klonálnym derivátom buniek V79, ktoré boli ošetrené etylmetánsulfonátom. Bunky vykazujú deficit galaktokinázy a sú rezistentné voči 2-deoxygalaktóze a 8-azaguanínu.
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Normálny pľúcny fibroblast (s deficitom galaktokinázy; derivát V79 mutovaný metódou EMS; rezistentný voči 2-deoxygalaktóze a 8-azaguanínu)
Miesto metastáz
Neplatí (bunka z pľúcneho fibroblastu čínskeho škrečka; nejde o vzorku nádoru)
Aplikácie
Výskum mutácií; genetická toxikológia; testovanie genotoxicity; štúdie komplementácie deficitu galaktokinázy; genetika rodičovského kmeňa V79 s deficitom HPRT; porovnania modelov CHO a V79; výskum opravy DNA

02Klasifikácia

Organizmus
Čínsky škrečok
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o štatúte GMO
No genetic modification (mutagenesis by EMS is a chemical mutagen treatment, not stable transgene introduction); carries galactokinase deficiency and 8-azaguanine resistance arising from endogenous mutations
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblastom podobné
Typ bunky
Fibroblasty
Karyotyp
2n = 22
Doba zdvojnásobenia
približne 14 až 18 hodín (odvodené od V79; rýchle zdvojnásobenie)

04Identifikátory

Citácia
V79-GalK1 (katalógové číslo Cytion 305011)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_2989

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Pomer rozdelenia
1 až 5
Hustota výsevu
2–4 × 10⁴/cm²
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Etnická príslušnosť
Neplatí (bunka čínskeho škrečka)