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V79-GalK1
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Fibroblasto pulmonar normal (con deficiencia de galactocinasa; derivado V79 mutagenizado con EMS; resistente a la 2-desoxigalactosa y a la 8-azaguanina)
Lugar de metástasis
No aplicable (línea celular de fibroblastos de pulmón de hámster chino; no es una muestra tumoral)

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V79-GalK1

Cell line · Número de producto 305011

Esta línea celular es un derivado clonal de las células V79 que habían sido tratadas con etilmetanosulfonato. Las células presentan una deficiencia de galactocinasa y son resistentes...

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Personalización / Recomendaciones

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Lote
Recomendado (lote más fresco)
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1

01Información general

Descripción
Esta línea celular es un derivado clonal de las células V79 que habían sido tratadas con etilmetanosulfonato. Las células son deficientes en galactocinasa y resistentes a la 2-deoxigalactosa y a la 8-azaguanina.
Pañuelo de papel
Pulmón
Enfermedad
Fibroblasto pulmonar normal (con deficiencia de galactocinasa; derivado V79 mutagenizado con EMS; resistente a la 2-desoxigalactosa y a la 8-azaguanina)
Lugar de metástasis
No aplicable (línea celular de fibroblastos de pulmón de hámster chino; no es una muestra tumoral)
Aplicaciones
Investigación sobre mutaciones; toxicología genética; ensayos de genotoxicidad; estudios de complementación de la deficiencia de galactoquinasa; genética del progenitor V79 con deficiencia de HPRT; comparaciones entre los modelos CHO y V79; investigación sobre la reparación del ADN

02Clasificación

Organismo
Hámster chino
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
Sin OGM
Detalles sobre la presencia de OMG
No genetic modification (mutagenesis by EMS is a chemical mutagen treatment, not stable transgene introduction); carries galactokinase deficiency and 8-azaguanine resistance arising from endogenous mutations
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Fibroblastos
Tipo de célula
Fibroblastos
Cariotipo
2n=22
Tiempo de duplicación
aprox. de 14 a 18 horas (derivado de V79; duplicación rápida)

04Identificadores

Referencia
V79-GalK1 (número de catálogo de Cytion: 305011)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_2989

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Relación de división
Del 1 al 5
Densidad de siembra
2-4*10⁴/cm²
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Origen étnico
No aplicable (línea celular de hámster chino)