Ga naar de inhoud
V79-GalK1
Weefsel
Long
Ziekte
Normale longfibroblast (met galactokinasedeficiëntie; EMS-gemutageniseerd V79-derivaat; resistent tegen 2-deoxygalactose en 8-azaguanine)
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (cellijn van longfibroblasten van de Chinese hamster; geen tumormonster)

Documenten

V79-GalK1

Cell line · Productnummer 305011

Deze cellijn is een klonaal afgeleide van V79-cellen die met ethylmethaansulfonaat waren behandeld. De cellen vertonen een tekort aan galactokinase en zijn resistent...

€420.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving
Deze cellijn is een klonale afgeleide van V79 cellen die behandeld zijn met ethylmethanesulfonaat. De cellen hebben een tekort aan galactokinase en zijn resistent tegen 2-deoxygalactose en 8-azaguanine.
Weefsel
Long
Ziekte
Normale longfibroblast (met galactokinasedeficiëntie; EMS-gemutageniseerd V79-derivaat; resistent tegen 2-deoxygalactose en 8-azaguanine)
Plaats van uitzaaiingen
Niet van toepassing (cellijn van longfibroblasten van de Chinese hamster; geen tumormonster)
Toepassingen
Mutatieonderzoek; genetische toxicologie; genotoxiciteitstesten; complementatiestudies naar galactokinasedeficiëntie; genetica van de HPRT-deficiënte ouder V79; vergelijkingen tussen CHO- en V79-modellen; onderzoek naar DNA-herstel

02Classificatie

Organisme
Chinese hamster
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
Zonder genetisch gemodificeerde organismen
Details over de GGO-status
No genetic modification (mutagenesis by EMS is a chemical mutagen treatment, not stable transgene introduction); carries galactokinase deficiency and 8-azaguanine resistance arising from endogenous mutations
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast-achtige
Celtype
Fibroblast
Karyotype
2n=22
Verdubbelingstijd
ongeveer 14 tot 18 uur (afgeleid van V79; snelle verdubbeling)

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
V79-GalK1 (Cytion-catalogusnummer 305011)
NCBI-belastingnummer
10029
Cellosaurus
CVCL_2989

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Splitsingsverhouding
1 tot en met 5
Zaaidichtheid
2-4*10⁴/cm²
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Etnische afkomst
Niet van toepassing (cellijn van de Chinese hamster)