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V79-GalK1
Tecido
Pulmão
Doença
Fibroblasto pulmonar normal (com deficiência de galactocinase; derivado V79 mutagenizado por EMS; resistente à 2-desoxigalactose e à 8-azaguanina)
Local da metástase
Não aplicável (linha celular de fibroblastos pulmonares de hamster chinês; não se trata de uma amostra tumoral)

Documentos

V79-GalK1

Cell line · Número do produto 305011

Esta linha celular é um derivado clonal das células V79 que foram tratadas com metanosulfonato de etilo. As células apresentam deficiência de galactocinase e são resistentes...

€420.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição
Esta linha celular é um derivado clonal das células V79 que foram tratadas com etilmetanossulfonato. As células apresentam deficiência de galactocinase e são resistentes à 2-desoxigalactose e à 8-azaguanina.
Tecido
Pulmão
Doença
Fibroblasto pulmonar normal (com deficiência de galactocinase; derivado V79 mutagenizado por EMS; resistente à 2-desoxigalactose e à 8-azaguanina)
Local da metástase
Não aplicável (linha celular de fibroblastos pulmonares de hamster chinês; não se trata de uma amostra tumoral)
Aplicações
Investigação sobre mutações; toxicologia genética; ensaios de genotoxicidade; estudos de complementação da deficiência de galactocinase; genética da linha parental V79 com deficiência de HPRT; comparações entre os modelos CHO e V79; investigação sobre a reparação do ADN

02Classificação

Organismo
Hamster chinês
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
Sem OGM
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
No genetic modification (mutagenesis by EMS is a chemical mutagen treatment, not stable transgene introduction); carries galactokinase deficiency and 8-azaguanine resistance arising from endogenous mutations
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos
Tipo de célula
Fibroblastos
Cariótipo
2n = 22
Tempo de duplicação
aprox. 14 a 18 horas (derivado da V79; duplicação rápida)

04Identificadores

Referência
V79-GalK1 (número de catálogo da Cytion 305011)
Número de identificação fiscal do NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_2989

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 5
Densidade de sementeira
2-4*10⁴/cm²
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Etnia
Não aplicável (linha celular de hamster chinês)