الانتقال إلى المحتوى
RD
الأنسجة
جنيني
المرض
الساركوما العضلية الرهيبية
موقع الانتشار
لا ينطبق (الساركوما العضلية المخططة الجنينية؛ سلالة مشتقة من نسيج جنيني، وليست عينة منتشرة)
المرادفات
R D, RD-2, RD 2, 130T, 130-T, 130 T, TE-32, TE 32, TE32, TE 32.T, Te 32.T

المستندات

RD

Cell line · رقم المنتج 300401

This line has recently been shown to be at least parental, if not identical, to TE-671.

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
وقد تبيّن مؤخرًا أن هذا الخط على الأقل أبوي إن لم يكن متطابقًا مع TE-671.
الأنسجة
جنيني
المرض
الساركوما العضلية الرهيبية
موقع الانتشار
لا ينطبق (الساركوما العضلية المخططة الجنينية؛ سلالة مشتقة من نسيج جنيني، وليست عينة منتشرة)
التطبيقات
أبحاث الساركوما العضلية المخططة؛ بيولوجيا الساركوما لدى الأطفال؛ دراسات تمايز العضلات الهيكلية؛ حساسية الأدوية (فينكريستين، داكتينوميسين، سيكلوفوسفاميد)؛ تحليل عوامل النسخ العضلية المنشأ؛ اختبارات قابلية الإصابة بالفيروسات
المرادفات
  • R D
  • RD-2
  • RD 2
  • 130T
  • 130-T
  • 130 T
  • TE-32
  • TE 32
  • TE32
  • TE 32.T
  • Te 32.T

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
خالية من الكائنات المعدلة وراثيًا
تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
No genetic modification; parental RD rhabdomyosarcoma line. Note: TE-671 derivative status does not imply engineering; both lines are naturally occurring tumors.
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
مختلطة (خلايا مغزلية وخلايا كبيرة متعددة النوى)
نوع الخلية
خلايا مغزلية وخلايا كبيرة متعددة النوى
النمط الكروموسومي
2n=48
زمن المضاعفة
حوالي 24 إلى 36 ساعة

04المعرّفات

المرجع
RD (كتالوج سايتون رقم 300401)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_1649

05التعبير والقابلية للإصابة

الإيزوزيمات
G6PD، ب
قابلية الإصابة بالفيروس
فيروس شلل الأطفال 1، والتهاب الفم الحويصلي (إنديانا)، والهربس البسيط، واللقاح
إنزيم النسخ العكسي
سلبي
المنتجات
الميوغلوبين، ميوسين أتباز الميوسلين

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
نسبة التقسيم
من 1 إلى 3
كثافة البذر
من 1 إلى 3 × 10⁴ خلية/سم²
تجديد السوائل
كل 3 إلى 4 أيام
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد إذابة الثلج، قم بزرع الخلايا بمعدل 5 × 10⁴ خلية/سم² واتركها لمدة 24 ساعة على الأقل حتى تلتصق قبل إجراء أول تغيير للوسط.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
الجنين
الأصل العرقي
قوقازي