Přejít na obsah
RD
Tkáň
Embryonální
Nemoc
Rabdomyosarkom
Místo metastázy
Neplatí (embryonální rabdomyosarkom; linie odvozená z embryonální tkáně, nejedná se o metastatický vzorek)
Synonyma
R D, RD-2, RD 2, 130T, 130-T, 130 T, TE-32, TE 32, TE32, TE 32.T, Te 32.T

Dokumenty

RD

Cell line · Číslo výrobku 300401

This line has recently been shown to be at least parental, if not identical, to TE-671.

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis
Nedávno se ukázalo, že tato linie je přinejmenším příbuzná, ne-li totožná s linií TE-671.
Tkáň
Embryonální
Nemoc
Rabdomyosarkom
Místo metastázy
Neplatí (embryonální rabdomyosarkom; linie odvozená z embryonální tkáně, nejedná se o metastatický vzorek)
Aplikace
Výzkum rabdomyosarkomu; biologie dětských sarkomů; studie diferenciace kosterního svalstva; citlivost na léčiva (vinkristin, daktinomycin, cyklofosfamid); analýza myogenních transkripčních faktorů; testy citlivosti na viry
Synonyma
  • R D
  • RD-2
  • RD 2
  • 130T
  • 130-T
  • 130 T
  • TE-32
  • TE 32
  • TE32
  • TE 32.T
  • Te 32.T

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o statusu GMO
No genetic modification; parental RD rhabdomyosarcoma line. Note: TE-671 derivative status does not imply engineering; both lines are naturally occurring tumors.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Smíšený (vřetenovité buňky a velké vícejaderné buňky)
Typ buňky
Vřetenovité buňky a velké vícejaderné buňky
Karyotyp
2n=48
Doba zdvojnásobení
přibližně 24 až 36 hodin

04Identifikátory

Citace
RD (katalogové číslo Cytion 300401)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1649

05Exprese a náchylnost

Isoenzymy
G6PD, B
Náchylnost k virům
Poliovirus 1, vezikulární stomatitida (Indiana), herpes simplex, vakcína
Reverzní transkriptáza
Negativní
Produkty
Myoglobin, myozinová ATPáza

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Poměr rozdělení
1 až 3
Hustota výsevu
1 až 3 × 10⁴ buněk/cm²
Obnova tekutin
Každé 3 až 4 dny
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky na kultivační misky v hustotě 5 × 10⁴ buněk/cm² a před první výměnou média počkejte alespoň 24 hodin, aby se buňky přichytily.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
Embrya
Etnická příslušnost
Kavkazský