Tartalomra ugrás
RD
Szövet
Embrionális
Betegség
Rhabdomyosarcoma
Áttétes hely
Nem alkalmazható (embrionális rabdomioszarkóma; az embrionális szövetből származó sejtvonal, nem metasztatikus minta)
Szinonimák
R D, RD-2, RD 2, 130T, 130-T, 130 T, TE-32, TE 32, TE32, TE 32.T, Te 32.T

Dokumentumok

RD

Cell line · Termékszám 300401

This line has recently been shown to be at least parental, if not identical, to TE-671.

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás
A közelmúltban kimutatták, hogy ez a vonal legalábbis szülői, ha nem azonos a TE-671-gyel.
Szövet
Embrionális
Betegség
Rhabdomyosarcoma
Áttétes hely
Nem alkalmazható (embrionális rabdomioszarkóma; az embrionális szövetből származó sejtvonal, nem metasztatikus minta)
Alkalmazások
Rabdomioszarkóma-kutatás; gyermekkorú szarkómák biológiája; vázizom-differenciálódási vizsgálatok; gyógyszerérzékenység (vinkrisztin, daktinomicin, ciklofoszfamid); miogén transzkripciós faktorok elemzése; vírusérzékenységi vizsgálatok
Szinonimák
  • R D
  • RD-2
  • RD 2
  • 130T
  • 130-T
  • 130 T
  • TE-32
  • TE 32
  • TE32
  • TE 32.T
  • Te 32.T

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; parental RD rhabdomyosarcoma line. Note: TE-671 derivative status does not imply engineering; both lines are naturally occurring tumors.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Vegyes (orsósejtek és nagy, többmagvú sejtek)
Sejttípus
Orsósejtek és nagy, többmagvú sejtek
Kariotípus
2n=48
Kettőzési idő
kb. 24–36 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
RD (Cytion katalógusszám: 300401)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1649

05Kifejeződés és fogékonyság

Izoenzimek
G6PD, B
Vírusérzékenység
Poliovírus 1, hólyagos szájgyulladás (Indiana), herpes simplex, vaccinia
Fordított transzkriptáz
Negatív
Termékek
Myoglobin, miozin ATPáz

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Osztási arány
1–3
Ültetési sűrűség
1–3 × 10⁴ sejt/cm²
Folyadékcsere
3-4 naponta
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után a sejteket 5 × 10⁴ sejt/cm² sűrűséggel ültessük be a tenyésztőedénybe, és az első tápközeg-csere előtt legalább 24 órát várjunk, hogy a sejtek tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
Embrió
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi