Μετάβαση στο περιεχόμενο
RD
Ιστός
Εμβρυϊκή
Ασθένεια
Ραβδομυοσάρκωμα
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (εμβρυϊκό ραβδομυοσάρκωμα· σειρά που προέρχεται από εμβρυϊκό ιστό, δεν πρόκειται για μεταστατικό δείγμα)
Συνώνυμα
R D, RD-2, RD 2, 130T, 130-T, 130 T, TE-32, TE 32, TE32, TE 32.T, Te 32.T

Έγγραφα

RD

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300401

This line has recently been shown to be at least parental, if not identical, to TE-671.

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Η γραμμή αυτή αποδείχθηκε πρόσφατα ότι είναι τουλάχιστον γονική, αν όχι πανομοιότυπη, με την TE-671.
Ιστός
Εμβρυϊκή
Ασθένεια
Ραβδομυοσάρκωμα
Θέση μετάστασης
Δεν ισχύει (εμβρυϊκό ραβδομυοσάρκωμα· σειρά που προέρχεται από εμβρυϊκό ιστό, δεν πρόκειται για μεταστατικό δείγμα)
Εφαρμογές
Έρευνα για το ραβδομυοσάρκωμα· βιολογία του παιδιατρικού σαρκώματος· μελέτες διαφοροποίησης των σκελετικών μυών· ευαισθησία σε φάρμακα (βινκριστίνη, δακτινομυκίνη, κυκλοφωσφαμίδη)· ανάλυση μυογενών μεταγραφικών παραγόντων· δοκιμασίες ευαισθησίας σε ιούς
Συνώνυμα
  • R D
  • RD-2
  • RD 2
  • 130T
  • 130-T
  • 130 T
  • TE-32
  • TE 32
  • TE32
  • TE 32.T
  • Te 32.T

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
Χωρίς ΓΤΟ
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
No genetic modification; parental RD rhabdomyosarcoma line. Note: TE-671 derivative status does not imply engineering; both lines are naturally occurring tumors.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Μικτή (κυτταρικά σπειροειδή και μεγάλα πολυπυρηνικά κύτταρα)
Τύπος κυττάρου
Ατρακτοειδή κύτταρα και μεγάλα πολυπύρηνα κύτταρα
Καρυότυπος
2n=48
Χρόνος διπλασιασμού
περίπου 24 έως 36 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
RD (αριθμός καταλόγου Cytion 300401)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_1649

05Έκφραση και ευαισθησία

Ισοένζυμα
G6PD, B
Ευαισθησία στον ιό
Ιός της πολιομυελίτιδας 1, φυσαλιδώδης στοματίτιδα (Indiana), απλός έρπης, εμβολιασμός
Αντίστροφη μεταγραφάση
Αρνητικό
Προϊόντα
Μυοσφαιρίνη, μυοσίνη ΑΤΡάση

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Αναλογία διαχωρισμού
1 έως 3
Πυκνότητα σποράς
1 έως 3 × 10⁴ κύτταρα/cm²
Ανανέωση υγρών
Κάθε 3 έως 4 ημέρες
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, μεταφέρετε τα κύτταρα σε τρυβλία με πυκνότητα 5 × 10⁴ κύτταρα/cm² και αφήστε τα να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες πριν από την πρώτη αλλαγή του θρεπτικού μέσου.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Έμβρυο
Εθνικότητα
Καυκάσιος