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RD
Pañuelo de papel
Embrión
Enfermedad
Rabdomiosarcoma
Lugar de metástasis
No aplicable (rabdomiosarcoma embrionario; línea derivada de tejido embrionario, no se trata de una muestra metastásica)
Sinónimos
R D, RD-2, RD 2, 130T, 130-T, 130 T, TE-32, TE 32, TE32, TE 32.T, Te 32.T

Documentos

RD

Cell line · Número de producto 300401

This line has recently been shown to be at least parental, if not identical, to TE-671.

€430.00sin impuestos ni gastos de envío
En stock
Lote
Recomendado (lote más fresco)
  • CoA
1

01Información general

Descripción
Recientemente se ha demostrado que esta línea es al menos parental, si no idéntica, a la TE-671.
Pañuelo de papel
Embrión
Enfermedad
Rabdomiosarcoma
Lugar de metástasis
No aplicable (rabdomiosarcoma embrionario; línea derivada de tejido embrionario, no se trata de una muestra metastásica)
Aplicaciones
Investigación sobre el rabdomiosarcoma; biología del sarcoma pediátrico; estudios sobre la diferenciación del músculo esquelético; sensibilidad a los fármacos (vincristina, dactinomicina, ciclofosfamida); análisis de factores de transcripción miogénicos; ensayos de susceptibilidad a los virus
Sinónimos
  • R D
  • RD-2
  • RD 2
  • 130T
  • 130-T
  • 130 T
  • TE-32
  • TE 32
  • TE32
  • TE 32.T
  • Te 32.T

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
Sin OGM
Detalles sobre la presencia de OMG
No genetic modification; parental RD rhabdomyosarcoma line. Note: TE-671 derivative status does not imply engineering; both lines are naturally occurring tumors.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Misto (células fusiformes y células grandes multinucleadas)
Tipo de célula
Células fusiformes y grandes células multinucleadas
Cariotipo
2n=48
Tiempo de duplicación
entre 24 y 36 horas, aproximadamente

04Identificadores

Referencia
RD (número de catálogo 300401 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1649

05Expresión y susceptibilidad

Isoenzimas
G6PD, B
Susceptibilidad a los virus
Poliovirus 1, estomatitis vesicular (Indiana), herpes simple, vaccinia
Transcriptasa inversa
Negativo
Productos
Mioglobina, miosina ATPasa

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Relación de división
Del 1 al 3
Densidad de siembra
De 1 a 3 × 10⁴ células/cm²
Renovación de fluidos
Cada 3 ó 4 días
Recuperación tras la descongelación
Tras la descongelación, siembre las células a una densidad de 5 × 10⁴ células/cm² y deje que se adhieran durante al menos 24 horas antes del primer cambio de medio.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
Embrión
Origen étnico
Caucásico