Mine otse sisu juurde
RD
Kude
Embrüonaalne
Haigus
Rabdomüosarkoom
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (embrüonaalne rabdomüosarkoom; embrüonaalsest koest saadud rakuliin, mitte metastaatiline proov)
Sünonüümid
R D, RD-2, RD 2, 130T, 130-T, 130 T, TE-32, TE 32, TE32, TE 32.T, Te 32.T

Dokumendid

RD

Cell line · Toote number 300401

This line has recently been shown to be at least parental, if not identical, to TE-671.

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus
Hiljuti on näidatud, et see liin on vähemalt vanem, kui mitte identne TE-671-ga.
Kude
Embrüonaalne
Haigus
Rabdomüosarkoom
Metastaaside asukoht
Ei kohaldata (embrüonaalne rabdomüosarkoom; embrüonaalsest koest saadud rakuliin, mitte metastaatiline proov)
Rakendused
rabdomüosarkoomi uurimine; laste sarkoomi bioloogia; skeletilihaste diferentseerumise uuringud; ravimite suhtes tundlikkus (vinkristiin, daktinomütsiin, tsüklofosfamiid); müogeensete transkriptsioonifaktorite analüüs; viiruste suhtes tundlikkuse testid
Sünonüümid
  • R D
  • RD-2
  • RD 2
  • 130T
  • 130-T
  • 130 T
  • TE-32
  • TE 32
  • TE32
  • TE 32.T
  • Te 32.T

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-vaba
GMO-staatuse üksikasjad
No genetic modification; parental RD rhabdomyosarcoma line. Note: TE-671 derivative status does not imply engineering; both lines are naturally occurring tumors.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Segatüüpi (võllrakud ja suured mitmetuumalised rakud)
Rakutüüp
Spindlirakud ja suured mitme tuumaga rakud
Karyotüüp
2n=48
Kahekordistumisaeg
umbes 24–36 tundi

04Tunnused

Viide
RD (Cytioni katalooginumber 300401)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1649

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Isoensüümid
G6PD, B
Viirusele vastuvõtlikkus
Polioviirus 1, vesikulaarne stomatiit (Indiana), herpes simplex, vaktsiiniaviirus
Pöördtranskriptaas
Negatiivne
Tooted
Müoglobiin, müosiini ATPaas

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1–3 × 10⁴ rakku/cm²
Vedeliku vahetus
Iga 3 kuni 4 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist külvake rakud tihedusega 5 × 10⁴ rakku/cm² ja laske neil enne esimest kasvukeskkonna vahetust vähemalt 24 tundi kinnituda.
Sulatamine ja kasvatamine

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
Embrüo
Etniline kuuluvus
Kaukaasia