Pereiti prie turinio
RD
Audinys
Embrioninis
Liga
Rabdomiosarkoma
Metastazių vieta
Netaikoma (embrioninė rabdomiosarkoma; ląstelių linija, gauta iš embrioninio audinio, o ne iš metastazės mėginio)
Sinonimai
R D, RD-2, RD 2, 130T, 130-T, 130 T, TE-32, TE 32, TE32, TE 32.T, Te 32.T

Dokumentai

RD

Cell line · Prekės numeris 300401

This line has recently been shown to be at least parental, if not identical, to TE-671.

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas
Neseniai buvo įrodyta, kad ši linija yra bent jau gimininga, jei ne identiška, TE-671 linijai.
Audinys
Embrioninis
Liga
Rabdomiosarkoma
Metastazių vieta
Netaikoma (embrioninė rabdomiosarkoma; ląstelių linija, gauta iš embrioninio audinio, o ne iš metastazės mėginio)
Paraiškos
Rabdomiosarkomos tyrimai; vaikų sarkomų biologija; skeleto raumenų diferenciacijos tyrimai; jautrumas vaistams (vinkristinas, daktinomicinas, ciklofosfamidas); miogeninių transkripcijos veiksnių analizė; jautrumo virusams tyrimai
Sinonimai
  • R D
  • RD-2
  • RD 2
  • 130T
  • 130-T
  • 130 T
  • TE-32
  • TE 32
  • TE32
  • TE 32.T
  • Te 32.T

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
Be GMO
Išsami informacija apie GMO statusą
No genetic modification; parental RD rhabdomyosarcoma line. Note: TE-671 derivative status does not imply engineering; both lines are naturally occurring tumors.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Mišrus (verpstės formos ląstelės ir didelės daugiabranduolės ląstelės)
Ląstelių tipas
Verpstės formos ląstelės ir didelės daugiabranduolės ląstelės
Kariotipas
2n=48
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
maždaug nuo 24 iki 36 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
RD (Cytion katalogo numeris 300401)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1649

05Išraiška ir jautrumas

Izofermentai
G6PD, B
Jautrumas virusams
Poliovirusas 1, vezikulinis stomatitas (Indiana), paprastoji pūslelinė, vakcina
Atvirkštinė transkriptazė
Neigiamas
Produktai
Mioglobinas, miozino ATPazė

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skaidymo santykis
1–3
Sėjos tankis
nuo 1 iki 3 × 10⁴ ląstelių/cm²
Skysčių atnaujinimas
Kas 3-4 dienas
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, ląsteles išsėkite į lėkšteles, išlaikydami tankį 5 × 10⁴ ląstelių/cm², ir prieš pirmąjį terpės keitimą palaukite mažiausiai 24 valandas, kol ląstelės prisitvirtins.
Atšildymas ir auginimas

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
Embrionas
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių