Gå direkt till innehållet
RD
Vävnad
Embryonal
Sjukdom
Rhabdomyosarkom
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (embryonalt rabdomyosarkom; cellinje härledd från embryonal vävnad, inte ett metastaserat prov)
Synonymer
R D, RD-2, RD 2, 130T, 130-T, 130 T, TE-32, TE 32, TE32, TE 32.T, Te 32.T

Dokument

RD

Cell line · Produktnummer 300401

This line has recently been shown to be at least parental, if not identical, to TE-671.

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning
Denna linje har nyligen visat sig vara åtminstone parental, om inte identisk, med TE-671.
Vävnad
Embryonal
Sjukdom
Rhabdomyosarkom
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (embryonalt rabdomyosarkom; cellinje härledd från embryonal vävnad, inte ett metastaserat prov)
Ansökningar
Forskning om rabdomyosarkom; biologi hos sarkom hos barn; studier av skelettmuskeldifferentiering; läkemedelskänslighet (vinkristin, daktinomycin, cyklofosfamid); analys av myogena transkriptionsfaktorer; tester av viruskänslighet
Synonymer
  • R D
  • RD-2
  • RD 2
  • 130T
  • 130-T
  • 130 T
  • TE-32
  • TE 32
  • TE32
  • TE 32.T
  • Te 32.T

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
Utan genetiskt modifierade organismer
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; parental RD rhabdomyosarcoma line. Note: TE-671 derivative status does not imply engineering; both lines are naturally occurring tumors.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Blandad (spindelceller och stora flerkärniga celler)
Celltyp
Spindelceller och stora flerkärniga celler
Karyotyp
2n=48
Fördubblingstid
ca 24 till 36 timmar

04Identifierare

Källa
RD (Cytion katalognummer 300401)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1649

05Uttryck och mottaglighet

Isoenzymer
G6PD, B
Virusmottaglighet
Poliovirus 1, vesikulär stomatit (Indiana), herpes simplex, vaccinia
Omvänt transkriptas
Negativt
Produkter
Myoglobin, myosin ATPas

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Uppdelningsförhållande
1 till 3
Såtäthet
1 till 3 × 10⁴ celler/cm²
Vätskeförnyelse
Var 3:e till 4:e dag
Återhämtning efter upptining
Efter upptining ska cellerna odlas ut med en täthet på 5 × 10⁴ celler/cm² och få vidhäfta i minst 24 timmar innan det första medielbytet.
Upptining och odling

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Embryo
Etnicitet
Kaukasisk