Skip to content
RD
Tissue
ตัวอ่อน
Disease
แรบโดไมโอซาร์โคมา
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (มะเร็งเนื้อเยื่ออ่อนชนิดเอ็มบริโอนิก; สายพันธุ์ที่ได้จากเนื้อเยื่อเอ็มบริโอนิก ไม่ใช่ตัวอย่างที่แพร่กระจาย)
Synonyms
R D, RD-2, RD 2, 130T, 130-T, 130 T, TE-32, TE 32, TE32, TE 32.T, Te 32.T

Documents

RD

Cell line · Product number 300401

This line has recently been shown to be at least parental, if not identical, to TE-671.

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
สายพันธุ์นี้ได้รับการแสดงให้เห็นเมื่อไม่นานมานี้ว่ามีอย่างน้อยเป็นสายพันธุ์ของพ่อแม่ หากไม่เหมือนกันกับ TE-671
Tissue
ตัวอ่อน
Disease
แรบโดไมโอซาร์โคมา
Metastatic site
ไม่สามารถใช้ได้ (มะเร็งเนื้อเยื่ออ่อนชนิดเอ็มบริโอนิก; สายพันธุ์ที่ได้จากเนื้อเยื่อเอ็มบริโอนิก ไม่ใช่ตัวอย่างที่แพร่กระจาย)
Applications
การวิจัยมะเร็งกล้ามเนื้อลายชนิดแรบโดไมโอซาร์โคมา; ชีววิทยาของซาร์โคมาในเด็ก; การศึกษาการแยกตัวของกล้ามเนื้อลาย; ความไวต่อยา (วินคริสทีน, แดคตินอมัยซิน, ไซโคลฟอสฟาไมด์); การวิเคราะห์ปัจจัยการถอดรหัสของกล้ามเนื้อ; การทดสอบความไวต่อไวรัส
Synonyms
  • R D
  • RD-2
  • RD 2
  • 130T
  • 130-T
  • 130 T
  • TE-32
  • TE 32
  • TE32
  • TE 32.T
  • Te 32.T

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
GMO status
Non-GMO
GMO status details
No genetic modification; parental RD rhabdomyosarcoma line. Note: TE-671 derivative status does not imply engineering; both lines are naturally occurring tumors.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ผสม (เซลล์แกนและเซลล์หลายนิวเคลียสขนาดใหญ่)
Cell type
เซลล์สปินเดิลและเซลล์หลายนิวเคลียสขนาดใหญ่
Karyotype
2n เท่ากับ 48
Doubling time
ประมาณ 24 ถึง 36 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
อาร์ดี (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300401)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_1649

05Expression and susceptibility

Isoenzymes
จี6พีดี, บี
Virus susceptibility
โปลิโอไวรัส 1, โรคปากและเท้าเปื่อย (อินเดียนา), เริม, วัคซีน
Reverse transcriptase
เชิงลบ
Products
ไมโอโกลบิน, ไมโอซิน เอทีพีเอส

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Split ratio
1 ถึง 3
Seeding density
1 ถึง 3 × 10⁴ เซลล์/ตารางเซนติเมตร
Fluid renewal
ทุก 3 ถึง 4 วัน
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเลี้ยงเซลล์บนจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 × 10⁴ เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ยึดเกาะอย่างน้อย 24 ชั่วโมงก่อนเปลี่ยนอาหารเลี้ยงเซลล์ครั้งแรก
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
เอ็มบริโอ
Ethnicity
คอเคเชียน