
- Тъкан
- Яйчник
- Заболяване
- Яйчници на китайски хамстер, ненеопластични; генетично модифицирани за повърхностна експресия на EGFR
Документи
CHO-EGFR
Cell line · Номер на продукта 305977
Забележка: Показаните цени за клетъчните линии са предназначени изключително за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цените...
Персонализиране / Препоръки
- CHO-EGFRCell line€1,900.00
01Обща информация
- Описание
Забележка: Посочените цени за клетъчните линии са предназначени изключително за академични/нестопански клиенти. За търговски субекти цената е приблизително 6 250 евро.
Ако представлявате търговски субект или не сте сигурни в коя категория попадате, моля свържете се с нас.
CHO-EGFR клетките са рекомбинантни клетки от яйчници на китайски хамстер (CHO), модифицирани да експресират стабилно човешкия рецептор на епидермалния растежен фактор (EGFR/ERBB1/HER1) – рецепторна тирозин киназа, принадлежаща към семейството ErbB. EGFR регулира ключови клетъчни процеси, включително пролиферация, оцеляване, миграция и диференциация чрез активиране на надолу по веригата сигнални пътища като MAPK/ERK, PI3K/AKT и JAK/STAT. Анормалната експресия, амплификация или мутация на EGFR често се свързва с множество солидни тумори, включително недребноклетъчен белодробен карцином, колоректален карцином, глиобластома и плоскоклетъчен карцином на главата и шията. Стабилните CHO-EGFR модели осигуряват контролирана платформа за изследване на биологията на рецептора и терапевтичното насочване.
CHO-EGFR клетките се използват широко в онкологичните изследвания и разработката на биологични продукти за характеризиране на анти-EGFR моноклонални антитела, инхибитори на тирозин киназа, биспецифични антитела, конюгати на антитела и лекарства и инженерни имунни клетъчни терапии. Тези клетки подпомагат количествената оценка на свързването на лиганда, активацията на рецептора, интернализацията, състоянието на фосфорилиране, сигналните пътища надолу по веригата и терапевтичната блокада. Те се използват често и в тестове с проточна цитометрия, проучвания на заетостта на рецепторите, скрининг с висока производителност и работни процеси за тестване на потентността. Тъй като CHO-клетките притежават стабилни характеристики на растеж и относително ниска ендогенна експресия на човешките рецепторни системи, те предлагат възпроизводима основа за рекомбинантна експресия на EGFR и разработване на стандартизирани тестове.
- Тъкан
- Яйчник
- Заболяване
- Яйчници на китайски хамстер, ненеопластични; генетично модифицирани за повърхностна експресия на EGFR
- Приложения
- Скрининг за антитела; разработване на терапия, насочена към EGFR; ADCC/CDC тестове; изследвания в областта на рака на белия дроб и колоректалния рак; проточна цитометрия
02Класификация
- Организъм
- Китайски хамстер
- Секс
- Женски
- Свойства, свързани с растежа
- Адхезивен и суспензионен
- Статус на ГМО
- GMO-S1
- Подробности относно статуса на ГМО
- GMO-S1: This CHO cell line contains an EGFR expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Подобни на епител
- Тип клетка
- Епителна клетка на яйчниците
- Време за удвояване
- около 14–16 часа
04Идентификатори
- Източник
- CHO-EGFR (каталожен номер на Cytion 305977)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 10029
- Целозавър
- CVCL_A8W3
05Проява и предразположеност
- Повърхностни антигени
- EGFR (HER1/ErbB1/CD340)
06Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
За адхезивни култури: DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
За суспензионни култури: CHO Growth Medium A (от InSCREENeX; каталожен номер INS-ME-1039 на InSCREENeX)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- За адхезивни култури: Допълнете средата с 5% FBS. Добавете Geneticin (G418-Sulfat), за да достигнете крайна концентрация от 0,5 mg/ml.
- Реагент за дисоциация
- За адхезивни култури: Трипсин-EDTA
- Пресаждане
- За рутинни адхезивни клетъчни култури: Аспирирайте старата хранителна среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, за да отстраните останалата среда. След като аспирирате PBS, добавете подходящия обем разтвор на трипсин/EDTA в зависимост от размера на съда за култивиране (напр. 1 ml за колба Т25, 3 ml за колба Т75) и инкубирайте при стайна температура или 37 °C за 5-10 минути или докато клетките се отделят. Наблюдавайте отделянето под микроскоп и ако е необходимо, леко потупайте съда, за да освободите клетките. След отделянето им добавете пълна среда, за да инактивирате трипсина/EDTA, внимателно ресуспендирайте клетките и прехвърлете аликвотна част от клетъчната суспензия в нов съд за култивиране, съдържащ прясна среда. Поставете съда в инкубатор, настроен на 37 °C с 5 %CO2, и сменяйте средата на всеки 2-3 дни.
- Коефициент на разделяне
- от 1 до 5
- Плътност на засяването
- 2 до 5 x 104 клетки/cm2
- Обновяване на течността
- 2 до 3 пъти седмично
- Възстановяване след размразяване
След размразяването разделете клетките в съотношение 1:2 до 1:3 в колби Т25 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да залепнат (за залепнали култури) за най-малко 24 часа.
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
08Дарител
- Възраст на донора
- Възрастни
09Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Прилагат се споразумения с трети страни
- Да