CHO-EGFR

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Le cellule CHO-EGFR sono cellule ricombinanti di ovaio di criceto cinese (CHO) ingegnerizzate per esprimere in modo stabile il recettore del fattore di crescita epidermico umano (EGFR/ERBB1/HER1), un recettore tirosin-chinasi appartenente alla famiglia ErbB. L'EGFR regola processi cellulari chiave quali proliferazione, sopravvivenza, migrazione e differenziazione attraverso l'attivazione di vie di segnalazione a valle quali MAPK/ERK, PI3K/AKT e JAK/STAT. L'espressione aberrante, l'amplificazione o la mutazione dell'EGFR sono frequentemente associate a diversi tumori solidi, tra cui il carcinoma polmonare non a piccole cellule, il carcinoma colorettale, il glioblastoma e il carcinoma a cellule squamose della testa e del collo. I modelli CHO-EGFR stabili forniscono una piattaforma controllata per lo studio della biologia del recettore e del targeting terapeutico.

Le cellule CHO-EGFR sono ampiamente utilizzate nella ricerca oncologica e nello sviluppo di prodotti biologici per la caratterizzazione di anticorpi monoclonali anti-EGFR, inibitori della tirosin-chinasi, anticorpi bispecifici, coniugati anticorpo-farmaco e terapie con cellule immunitarie ingegnerizzate. Queste cellule supportano la valutazione quantitativa del legame del ligando, dell'attivazione del recettore, dell'internalizzazione, dello stato di fosforilazione, della segnalazione a valle e del blocco terapeutico. Sono inoltre comunemente impiegate in saggi di citometria a flusso, studi sull’occupazione dei recettori, screening ad alta produttività e flussi di lavoro per i test di potenza. Poiché le cellule CHO presentano caratteristiche di crescita robuste e un’espressione endogena relativamente bassa dei sistemi recettoriali umani, offrono un background riproducibile per l’espressione ricombinante dell’EGFR e lo sviluppo di saggi standardizzati.

Per colture aderenti: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)

Per colture in sospensione: CHO Growth Medium A (da InSCREENeX; numero di catalogo InSCREENeX INS-ME-1039)

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

Dopo lo scongelamento, dividere le cellule in un rapporto da 1:2 a 1:3 in fiasche T25 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano (per le colture aderenti) per almeno 24 ore.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia