
- Gewebe
- Eierstock
- Krankheit
- Ovarialzellen des chinesischen Hamsters, nicht-neoplastisch; gentechnisch verändert zur Expression von EGFR auf der Zelloberfläche
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CHO-EGFR
Cell line · Artikelnummer 305977
Haftungsausschluss: Die für Zelllinien angegebenen Preise gelten ausschließlich für Kunden aus dem akademischen Bereich bzw. gemeinnützige Einrichtungen. Für gewerbliche Unternehmen gelten die Preise...
Anpassung / Empfehlungen
- CHO-EGFRCell line€1,900.00
01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
Haftungsausschluss: Die für Zelllinien angegebenen Preise gelten ausschließlich für akademische/gemeinnützige Kunden. Für kommerzielle Einrichtungen beträgt der Preis ca. 6.250 €.
Wenn Sie eine kommerzielle Einrichtung vertreten oder sich nicht sicher sind, welche Kategorie auf Sie zutrifft, kontaktieren Sie uns bitte.
CHO-EGFR-Zellen sind rekombinante Chinese-Hamster-Ovarialzellen (CHO-Zellen), die so verändert wurden, dass sie den humanen epidermalen Wachstumsfaktorrezeptor (EGFR/ERBB1/HER1), eine zur ErbB-Familie gehörende Rezeptortyrosinkinase, stabil exprimieren. EGFR reguliert wichtige zelluläre Prozesse wie Proliferation, Überleben, Migration und Differenzierung durch die Aktivierung nachgeschalteter Signalwege wie MAPK/ERK, PI3K/AKT und JAK/STAT. Eine abnorme EGFR-Expression, -Amplifikation oder -Mutation wird häufig mit verschiedenen soliden Tumoren in Verbindung gebracht, darunter nicht-kleinzelliger Lungenkrebs, Darmkrebs, Glioblastom und Plattenepithelkarzinome im Kopf- und Halsbereich. Stabile CHO-EGFR-Modelle bieten eine kontrollierte Plattform für die Untersuchung der Rezeptorbiologie und die Entwicklung therapeutischer Ansatzpunkte.
CHO-EGFR-Zellen werden in der onkologischen Forschung und der Entwicklung biologischer Präparate häufig zur Charakterisierung von monoklonalen Anti-EGFR-Antikörpern, Tyrosinkinase-Inhibitoren, bispezifischen Antikörpern, Antikörper-Wirkstoff-Konjugaten und gentechnisch veränderten Immunzelltherapien eingesetzt. Diese Zellen ermöglichen die quantitative Bewertung der Ligandenbindung, der Rezeptoraktivierung, der Internalisierung, des Phosphorylierungsstatus, der nachgeschalteten Signalübertragung und der therapeutischen Blockade. Sie werden zudem häufig in Durchflusszytometrie-Assays, Studien zur Rezeptorbelegung, im Hochdurchsatz-Screening und in Arbeitsabläufen zur Wirksamkeitsprüfung eingesetzt. Da CHO-Zellen robuste Wachstumseigenschaften und eine relativ geringe endogene Expression humaner Rezeptorsysteme aufweisen, bieten sie einen reproduzierbaren Hintergrund für die Expression rekombinanter EGFR und die Entwicklung standardisierter Assays.
- Gewebe
- Eierstock
- Krankheit
- Ovarialzellen des chinesischen Hamsters, nicht-neoplastisch; gentechnisch verändert zur Expression von EGFR auf der Zelloberfläche
- Anwendungen
- Antikörperscreening; Entwicklung von EGFR-gerichteten Therapien; ADCC-/CDC-Assays; Forschung zu Lungen- und Darmkrebs; Durchflusszytometrie
02Klassifizierung
- Organismus
- Chinesischer Hamster
- Sex
- Weiblich
- Wachstumseigenschaften
- Adhärente und Suspension
- GVO-Status
- GMO-S1
- Angaben zum GVO-Status
- GMO-S1: This CHO cell line contains an EGFR expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Epithelähnlich
- Zelltyp
- Epithelzelle des Eierstocks
- Verdopplungszeit
- ca. 14–16 Stunden
04Bezeichner
- Quellenangabe
- CHO-EGFR (Cytion-Katalognummer 305977)
- NCBI-Steuer-ID
- 10029
- Cellosaurus
- CVCL_A8W3
05Expression und Anfälligkeit
- Oberflächenantigene
- EGFR (HER1/ErbB1/CD340)
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
Für adhärente Kulturen: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Für Suspensionskulturen: CHO-Wachstumsmedium A (von InSCREENeX; InSCREENeX-Katalognummer INS-ME-1039)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Für adhärente Kulturen: Ergänzen Sie das Medium mit 5% FBS. Geneticin (G418-Sulfat) hinzufügen, um eine Endkonzentration von 0,5 mg/ml zu erreichen.
- Dissoziationsreagenz
- Für adhärente Kulturen: Trypsin-EDTA
- Subkultivierung
- Für die routinemäßige adhärente Zellkultur: Saugen Sie das alte Kulturmedium von den adhärenten Zellen ab und waschen Sie sie mit PBS, um das restliche Medium zu entfernen. Nach dem Absaugen des PBS die entsprechende Menge Trypsin/EDTA-Lösung je nach Größe des Kulturgefäßes zugeben (z. B. 1 ml für einen T25-Kolben, 3 ml für einen T75-Kolben) und bei Raumtemperatur oder 37 °C 5-10 Minuten lang inkubieren, oder bis sich die Zellen ablösen. Überwachen Sie die Ablösung unter dem Mikroskop und klopfen Sie bei Bedarf vorsichtig auf das Gefäß, um die Zellen freizusetzen. Sobald sich die Zellen abgelöst haben, fügen Sie vollständiges Medium hinzu, um das Trypsin/EDTA zu inaktivieren, resuspendieren Sie die Zellen vorsichtig und transferieren Sie einen aliquoten Teil der Zellsuspension in ein neues Kulturgefäß mit frischem Medium. Stellen Sie das Gefäß in einen Inkubator, der auf 37°C mit 5%CO2 eingestellt ist, und wechseln Sie das Medium alle 2-3 Tage.
- Split-Verhältnis
- 1 bis 5
- Aussaatdichte
- 2 bis 5 x 104 Zellen/cm2
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen im Verhältnis 1:2 bis 1:3 in T25-Kolben aufteilen und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen und anhaften lassen (bei adhärenten Kulturen).
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Sterilität
Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.
Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- Erwachsener
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Es gelten Vereinbarungen mit Dritten
- Ja