Gå til innholdet
CHO-EGFR
Vev
Eggstokk
Sykdom
Eggstokkceller fra kinesisk hamster, ikke-neoplastiske; genetisk modifisert for overflateekspresjon av EGFR

Dokumenter

CHO-EGFR

Cell line · Produktnummer 305977

Ansvarsfraskrivelse: Prisene som vises for cellelinjer gjelder utelukkende for akademiske kunder og kunder som driver ideell virksomhet. For kommersielle aktører gjelder prisene...

€1,900.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

Lages på bestilling
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

Ansvarsfraskrivelse: Prisene som vises for cellelinjer gjelder utelukkende for akademiske kunder og ideelle organisasjoner. For kommersielle aktører er prisen ca. 6 250 euro.
Hvis du representerer en kommersiell aktør eller er usikker på hvilken kategori som gjelder, vennligst kontakt oss.


CHO-EGFR-celler er rekombinante kinesiske hamster-eggstokkceller (CHO) som er konstruert for å uttrykke human epidermal vekstfaktorreseptor (EGFR/ERBB1/HER1) stabilt, en reseptortyrosinkinase som tilhører ErbB-familien. EGFR regulerer viktige cellulære prosesser, inkludert proliferasjon, overlevelse, migrasjon og differensiering gjennom aktivering av nedstrøms signalveier som MAPK/ERK, PI3K/AKT og JAK/STAT. Unormal EGFR-ekspresjon, amplifikasjon eller mutasjon er ofte assosiert med flere solide svulster, inkludert ikke-småcellet lungekreft, tykktarmskreft, glioblastom og plateepitelkarsinom i hode og nakke. Stabile CHO-EGFR-modeller gir en kontrollert plattform for å undersøke reseptorbiologi og terapeutisk målretting.

CHO-EGFR-celler er mye brukt i onkologisk forskning og utvikling av biologiske legemidler for karakterisering av monoklonale anti-EGFR-antistoffer, tyrosinkinasehemmere, bispesifikke antistoffer, antistoff-legemiddelkonjugater og konstruerte immuncelleterapier. Disse cellene støtter kvantitativ vurdering av ligandbinding, reseptoraktivering, internalisering, fosforyleringsstatus, nedstrøms signalering og terapeutisk blokkering. De brukes også ofte i flowcytometri-analyser, studier av reseptorbelegg, screening med høy gjennomstrømning og arbeidsflyter for potensbestemmelse. Fordi CHO-celler har robuste vekstegenskaper og relativt lavt endogent uttrykk av humane reseptorsystemer, gir de en reproduserbar bakgrunn for rekombinant EGFR-uttrykk og standardisert utvikling av analyser.

Vev
Eggstokk
Sykdom
Eggstokkceller fra kinesisk hamster, ikke-neoplastiske; genetisk modifisert for overflateekspresjon av EGFR
Søknader
Antistoffscreening; utvikling av EGFR-rettet terapi; ADCC-/CDC-analyser; forskning på lungekreft og tykktarmskreft; strømningscytometri

02Klassifisering

Organisme
Kinesisk hamster
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Adhesjon og suspensjon
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This CHO cell line contains an EGFR expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende
Celletype
Epitelcelle i eggstokken
Fordoblingstid
ca. 14–16 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
CHO-EGFR (Cytion-katalognummer 305977)
NCBI-skattenummer
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W3

05Uttrykk og mottakelighet

Overflateantigener
EGFR (HER1/ErbB1/CD340)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium

For adherente kulturer: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)

For suspensjonskulturer: CHO Growth Medium A (fra InSCREENeX; InSCREENeX katalognummer INS-ME-1039)

Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
For adherente kulturer: Suppler mediet med 5 % FBS. Tilsett Geneticin (G418-Sulfat) for å oppnå en sluttkonsentrasjon på 0,5 mg/ml.
Dissosiasjonsmiddel
For adherente kulturer: Trypsin-EDTA
Subkultivering
For rutinemessig adherent cellekultur: Aspirer det gamle dyrkningsmediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS for å fjerne eventuelt gjenværende medium. Etter at PBS er aspirert, tilsett et passende volum Trypsin/EDTA-løsning basert på størrelsen på dyrkingskaret (f.eks. 1 ml for en T25-kolbe, 3 ml for en T75-kolbe), og inkuber ved romtemperatur eller 37 °C i 5-10 minutter, eller til cellene løsner. Overvåk løsrivelsen under mikroskop, og bank forsiktig på beholderen om nødvendig for å frigjøre cellene. Når cellene har løsnet, tilsetter du komplett medium for å inaktivere trypsin/EDTA, resuspenderer cellene forsiktig og overfører en alikvot av cellesuspensjonen til et nytt dyrkingskar som inneholder nytt medium. Plasser karet i en inkubator innstilt på 37 °C med 5 %CO2, og bytt medium hver 2.-3. dag.
Oppdelingsforhold
1 til 5
Såtetthet
2 til 5 x 104 celler/cm2
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining

Etter tining deles cellene i forholdet 1:2 til 1:3 i T25-kolber, og cellene får komme seg etter fryseprosessen og feste seg (for adherente kulturer) i minst 24 timer.

Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Voksen