Pāriet uz saturu
CHO-EGFR
Audums
Olnīcas
Slimība
Ķīniešu kāmja olnīca, bez audzēja; ģenētiski modificēta EGFR virsmas ekspresijai

Dokumenti

CHO-EGFR

Cell line · Preces numurs 305977

Atbrīvojums no atbildības: Norādītās šūnu līniju cenas attiecas vienīgi uz akadēmiskajiem/bezpeļņas klientiem. Komerciālajām organizācijām cenas...

€1,900.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Pēc pasūtījuma
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Atbrīvojums no atbildības: Šeit norādītās šūnu līniju cenas attiecas tikai uz akadēmiskajiem/bezpeļņas klientiem. Komerciālām organizācijām cena ir aptuveni 6250 eiro.
Ja Jūs pārstāvat komerciālu organizāciju vai neesat pārliecināts, kura kategorija Jums attiecas, lūdzu, sazinieties ar mums.


CHO-EGFR šūnas ir rekombinantas Ķīnas kāmja olnīcu (CHO) šūnas, kas inženierijas ceļā modificētas, lai stabili ekspresētu cilvēka epidermālo augšanas faktora receptoru (EGFR/ERBB1/HER1) — ErbB ģimenei piederīgu receptoru tirozīnu kināzi. EGFR regulē galvenos šūnu procesus, tostarp proliferāciju, izdzīvošanu, migrāciju un diferenciāciju, aktivizējot pakārtotos signālceļus, piemēram, MAPK/ERK, PI3K/AKT un JAK/STAT. Patoloģiska EGFR ekspresija, amplifikācija vai mutācija bieži saistīta ar vairākiem cietajiem audzējiem, tostarp nesīkšūnu plaušu vēzi, kolorektālo vēzi, glioblastomu un galvas un kakla plakanšūnu karcinomu. Stabilie CHO-EGFR modeļi nodrošina kontrolētu platformu receptoru bioloģijas un terapeitiskās mērķtiecības izpētei.

CHO-EGFR šūnas plaši izmanto onkoloģijas pētījumos un bioloģisko zāļu izstrādē, lai raksturotu anti-EGFR monoklonālos antivielu, tirozīna kināzes inhibitorus, bispecifiskās antivielas, antivielu-zāļu konjugātus un inženierijas imūno šūnu terapijas. Šīs šūnas atbalsta kvantitatīvu liganda saistīšanās, receptora aktivācijas, internalizācijas, fosforilācijas statusa, pakārtotās signālizācijas un terapeitiskās blokādes novērtējumu. Tās tiek plaši izmantotas arī plūsmas citometrijas testos, receptoru aizņemamības pētījumos, augstas caurlaidspējas skrīningā un iedarbīguma testēšanas darba plūsmās. Tā kā CHO šūnas nodrošina stabilas augšanas īpašības un salīdzinoši zemu cilvēka receptoru sistēmu endogēno ekspresiju, tās piedāvā reproducējamu fonu rekombinantā EGFR ekspresijai un standartizētu testu izstrādei.

Audums
Olnīcas
Slimība
Ķīniešu kāmja olnīca, bez audzēja; ģenētiski modificēta EGFR virsmas ekspresijai
Pieteikumi
Antivielu skrīnings; EGFR mērķterapijas izstrāde; ADCC/CDC analīzes; plaušu un kolorektālā vēža pētījumi; plūsmas citometrija

02Klasifikācija

Organisms
Ķīniešu kāmītis
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This CHO cell line contains an EGFR expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Olnīcas epitēlija šūna
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
aptuveni 14–16 stundas

04Identifikatori

Atsauce
CHO-EGFR (Cytion kataloga numurs 305977)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W3

05Pazīmes un uzņēmība

Virsmas antigēni
EGFR (HER1/ErbB1/CD340)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne

Pielipušām kultūrām: DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)

Suspensijas kultūrām: CHO augšanas barotne A (no InSCREENeX; InSCREENeX kataloga numurs INS-ME-1039)

Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Pielipušām kultūrām: Pievienojiet barotni ar 5% FBS. Pievienojiet ģenētiķīnu (G418-Sulfat), lai sasniegtu 0,5 mg/ml galīgo koncentrāciju.
Disociācijas reaģents
Pielipušām kultūrām: Tripsīns-EDTA
Pārstādīšana
Parastai adherentu šūnu kultūrai: Lai noņemtu atlikušo barotni, aspirējiet veco barotni no pielipušajām šūnām un izskalojiet tās ar PBS, lai noņemtu atlikušo barotni. Pēc PBS atsūknēšanas pievienojiet atbilstošu tripsīna/EDTA šķīduma tilpumu, ņemot vērā kultūras trauka lielumu (piemēram, 1 ml T25 kolbai, 3 ml T75 kolbai), un inkubējiet istabas temperatūrā vai 37 °C 5 līdz 10 minūtes, vai līdz šūnas atdalās. Novērot atdalīšanos ar mikroskopu un, ja nepieciešams, viegli piesitiet trauku, lai atbrīvotu šūnas. Pēc atdalīšanās pievienot pilnu barotni, lai inaktivētu tripsīnu/EDTA, uzmanīgi resuspendēt šūnas un šūnu suspensijas alikvotu pārvietot jaunā barotnē ar svaigu barotni. Ievietot trauku inkubatorā, kas iestatīts 37 °C temperatūrā ar 5 %CO2, un ik pēc 2-3 dienām mainīt barotni.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 5
Sēšanas blīvums
2 līdz 5 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa

Pēc atkausēšanas sadaliet šūnas T25 kolbās proporcijā 1:2 līdz 1:3 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un salipt (adhēzijas kultūrām) vismaz 24 stundas.

Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo