Langsung ke isi
CHO-EGFR
Tisu
Ovarium
Penyakit
Ovarium hamster Cina, non-neoplastik; direkayasa secara genetik untuk ekspresi EGFR pada permukaan sel

Dokumen

CHO-EGFR

Cell line · Nomor produk 305977

Penafian: Harga yang ditampilkan untuk lini sel hanya berlaku bagi pelanggan dari kalangan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya...

€1,900.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Dibuat sesuai pesanan
1

01Informasi umum

Deskripsi

Pernyataan Penolakan: Harga yang ditampilkan untuk garis sel ini khusus berlaku bagi pelanggan akademis/nirlaba. Bagi entitas komersial, harganya sekitar €6.250.
Jika Anda mewakili entitas komersial atau tidak yakin kategori mana yang berlaku, silakan hubungi kami.


Sel CHO-EGFR adalah sel ovarium hamster Cina (CHO) rekombinan yang direkayasa untuk secara stabil mengekspresikan reseptor faktor pertumbuhan epidermal manusia (EGFR/ERBB1/HER1), sebuah reseptor tirosin kinase yang termasuk dalam keluarga ErbB. EGFR mengatur proses seluler kunci termasuk proliferasi, kelangsungan hidup, migrasi, dan diferensiasi melalui aktivasi jalur sinyal hilir seperti MAPK/ERK, PI3K/AKT, dan JAK/STAT. Ekspresi, amplifikasi, atau mutasi EGFR yang abnormal sering dikaitkan dengan berbagai tumor padat, termasuk kanker paru-paru sel non-kecil, kanker kolorektal, glioblastoma, dan karsinoma sel skuamosa kepala dan leher. Model CHO-EGFR yang stabil menyediakan platform terkontrol untuk menyelidiki biologi reseptor dan penargetan terapeutik.

Sel CHO-EGFR banyak digunakan dalam penelitian onkologi dan pengembangan produk biologis untuk karakterisasi antibodi monoklonal anti-EGFR, inhibitor tirosin kinase, antibodi bispesifik, konjugat antibodi-obat, dan terapi sel imun yang dimodifikasi. Sel-sel ini mendukung penilaian kuantitatif terhadap ikatan ligan, aktivasi reseptor, internalisasi, status fosforilasi, sinyal hilir, dan blokade terapeutik. Sel-sel ini juga umumnya digunakan dalam uji sitometri aliran, studi okupansi reseptor, skrining berkapasitas tinggi, dan alur kerja pengujian potensi. Karena sel CHO memiliki karakteristik pertumbuhan yang kuat dan ekspresi endogen sistem reseptor manusia yang relatif rendah, sel-sel ini menawarkan latar belakang yang dapat direproduksi untuk ekspresi EGFR rekombinan dan pengembangan uji yang terstandarisasi.

Tisu
Ovarium
Penyakit
Ovarium hamster Cina, non-neoplastik; direkayasa secara genetik untuk ekspresi EGFR pada permukaan sel
Aplikasi
Penyaringan antibodi; pengembangan terapi yang ditargetkan pada EGFR; uji ADCC/CDC; penelitian kanker paru-paru dan kolorektal; sitometri aliran

02Klasifikasi

Organisme
Hamster Cina
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Adhesi dan suspensi
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This CHO cell line contains an EGFR expression cassette supporting receptor-function analyses. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Jenis sel
Sel epitel ovarium
Waktu penggandaan
sekitar 14–16 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
CHO-EGFR (Nomor katalog Cytion 305977)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10029
Cellosaurus
CVCL_A8W3

05Ekspresi dan kerentanan

Antigen permukaan
EGFR (HER1/ErbB1/CD340)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur

Untuk kultur yang patuh: DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)

Untuk kultur suspensi: Media Pertumbuhan CHO A (dari InSCREENeX; nomor katalog InSCREENeX INS-ME-1039)

Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Untuk kultur yang patuh: Tambahkan media dengan 5% FBS. Tambahkan Geneticin (G418-Sulfat) untuk mencapai konsentrasi akhir 0,5 mg/mL.
Reagen disosiasi
Untuk kultur yang patuh: Tripsin-EDTA
Perbanyakan sel
Untuk kultur sel yang melekat secara rutin: Aspirasi media kultur lama dari sel yang melekat, dan cuci dengan PBS untuk menghilangkan media yang tersisa. Setelah menyedot PBS, tambahkan volume larutan Trypsin/EDTA yang sesuai berdasarkan ukuran bejana kultur (misalnya, 1 ml untuk labu T25, 3 ml untuk labu T75) dan inkubasi pada suhu kamar atau 37 ° C selama 5-10 menit, atau hingga sel terlepas. Pantau pelepasan di bawah mikroskop, dan ketuk bejana dengan lembut jika perlu untuk melepaskan sel. Setelah terlepas, tambahkan media lengkap untuk menonaktifkan Trypsin/EDTA, resuspensi sel dengan hati-hati, dan pindahkan alikuot suspensi sel ke dalam bejana kultur baru yang berisi media segar. Tempatkan bejana dalam inkubator yang diatur pada suhu 37°C dengan 5%CO2, dan ganti medium setiap 2-3 hari.
Rasio pemisahan
1 sampai 5
Kepadatan penanaman
2 hingga 5 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan

Setelah dicairkan, pisahkan sel dengan rasio 1:2 hingga 1:3 dalam labu T25 dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan dan melekat (untuk kultur yang melekat) setidaknya selama 24 jam.

Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Dewasa