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Gewebe
Zunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom
Metastasenherd
Zervikaler Lymphknoten
Synonyme
HSC 3, HSC3

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HSC-3

Cell line · Artikelnummer 305312

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

HSC-3 ist eine humane Zelllinie des oralen Plattenepithelkarzinoms (OSCC), die häufig zur Untersuchung der Biologie von Mundhöhlenkrebs verwendet wird, insbesondere in Studien, die sich mit Apoptose, Zellzyklusregulation und Krebsbehandlung befassen. Das orale Plattenepithelkarzinom ist die häufigste Form von Mundhöhlenkrebs und wird aufgrund seines hohen Metastasierungspotenzials und der späten Diagnose mit einer schlechten Prognose in Verbindung gebracht. HSC-3-Zellen werden aus einem Primärtumor gewonnen und sind für ihre aggressiven Eigenschaften bekannt, was sie zu einem wichtigen Modell für die Erprobung neuer Krebswirkstoffe und -therapien macht.

Mehrere Studien haben gezeigt, dass HSC-3-Zellen als Reaktion auf Naturstoffe und Krebsmittel Apoptose und Autophagie durchlaufen. So wurde beispielsweise festgestellt, dass Piperin, ein Alkaloid aus schwarzem Pfeffer, die Lebensfähigkeit der Zellen verringert und dosisabhängig Apoptose auslöst. In HSC-3-Zellen, die mit Piperin behandelt wurden, wurden apoptotische Körper, DNA-Fragmentierung und eine erhöhte Expression von pro-apoptotischen Proteinen wie Bax beobachtet. Darüber hinaus wurde gezeigt, dass Piperin sowohl die Apoptose als auch die Autophagie durch Hemmung des PI3K/Akt/mTOR-Signalwegs aktiviert, der für die Vermehrung und das Überleben von Krebszellen entscheidend ist. Auch andere Verbindungen wie Berberin und Geniposid lösen nachweislich Apoptose aus, indem sie das mitochondriale Membranpotenzial stören und den Caspase-Signalweg aktivieren.

Der Nutzen von HSC-3-Zellen erstreckt sich auch auf In-vivo-Studien, bei denen ihre Verwendung in Xenograft-Modellen von Mäusen eine Hemmung des Tumorwachstums bei Behandlung mit Naturstoffen wie Piperin gezeigt hat. Diese Zellen dienen als robuste Plattform für die Bewertung der Wirksamkeit sowohl herkömmlicher als auch neuartiger Krebstherapien.

Gewebe
Zunge
Krankheit
Plattenepithelkarzinom
Metastasenherd
Zervikaler Lymphknoten
Synonyme
  • HSC 3
  • HSC3

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Bezeichner

Quellenangabe
HSC-3 (Cytion-Katalognummer 305312)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1288

04Expression und Anfälligkeit

Mutationsprofil
Mutation: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozygot; Mutation: PIK3CA, p.Glu545Gly (c.1634A>G); Mutation: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T); Mutation: TP53, p.Lys305fs (c.912_913insTAAG)

05Handhabung und Kultur

Nährmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion-Artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS und 1% NEAA
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

07Spender

Alter des Spenders
64 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Japanisch