Přejít na obsah
Tkáň
Jazyk
Nemoc
Dlaždicobuněčný karcinom
Místo metastázy
Krční lymfatická uzlina
Synonyma
HSC 3, HSC3

Dokumenty

HSC-3

Cell line · Číslo výrobku 305312

€750.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

HSC-3 je buněčná linie lidského orálního spinocelulárního karcinomu (OSCC), která se běžně používá ke zkoumání biologie rakoviny ústní dutiny, zejména ve studiích zaměřených na apoptózu, regulaci buněčného cyklu a léčbu rakoviny. Spinocelulární karcinom dutiny ústní je nejčastějším typem rakoviny dutiny ústní a je spojen se špatnou prognózou kvůli vysokému metastatickému potenciálu a pozdnímu stadiu diagnózy. Buňky HSC-3 jsou odvozeny z primárního nádoru a jsou známy svými agresivními vlastnostmi, což z nich činí vhodný model pro testování nových protinádorových sloučenin a terapií.

Několik studií prokázalo, že buňky HSC-3 podléhají apoptóze a autofagii v reakci na přírodní sloučeniny a protinádorové látky. Například bylo zjištěno, že piperin, alkaloid z černého pepře, snižuje životaschopnost buněk a vyvolává apoptózu v závislosti na dávce. U buněk HSC-3, kterým byl podáván piperin, byla pozorována apoptotická tělíska, fragmentace DNA a zvýšená exprese proapoptotických proteinů, jako je Bax. Kromě toho se ukázalo, že piperin aktivuje apoptózu i autofagii prostřednictvím inhibice signální dráhy PI3K/Akt/mTOR, která je rozhodující pro proliferaci a přežití nádorových buněk. Podobně bylo prokázáno, že i další sloučeniny, jako berberin a geniposid, indukují apoptózu narušením mitochondriálního membránového potenciálu a aktivací kaspázových drah.

Využitelnost buněk HSC-3 se rozšiřuje i na studie in vivo, kde jejich použití v myších xenograftových modelech prokázalo inhibici růstu nádorů při léčbě přírodními sloučeninami, jako je piperin. Tyto buňky slouží jako spolehlivá platforma pro hodnocení účinnosti tradičních i nových způsobů léčby rakoviny.

Tkáň
Jazyk
Nemoc
Dlaždicobuněčný karcinom
Místo metastázy
Krční lymfatická uzlina
Synonyma
  • HSC 3
  • HSC3

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Identifikátory

Citace
HSC-3 (katalogové číslo Cytion 305312)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1288

04Exprese a náchylnost

Mutační profil
Mutace: (c.358G>T), homozygotní; Mutace: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T): PIK3CA, p.Glu545Gly (c.1634A>G); mutace: PIK3CA, p.Glu545Gly (c.1634A>G), homozygotní: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T); mutace: p.1-124C>T (c.228C>T): TP53, p.Lys305fs (c.912_913insTAAG)

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820100a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS a 1 % NEAA
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

07Dárce

Věk dárce
64 let
Etnická příslušnost
Japonský