Mine otse sisu juurde
Kude
Keel
Haigus
Rakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Kaelalümfisõlmede lümfisõlmede
Sünonüümid
HSC 3, HSC3

Dokumendid

HSC-3

Cell line · Toote number 305312

€750.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HSC-3 on inimese suuõõne lamerakk-kartsinoomi (OSCC) rakuliin, mida tavaliselt kasutatakse suuvähi bioloogia uurimiseks, eriti apoptoosi, rakutsükli reguleerimise ja vähiravi uuringutes. Suu lamerakk-kartsinoom on kõige levinum suuvähi tüüp ja seda seostatakse halva prognoosiga, mis tuleneb selle suure metastaatilise potentsiaali ja hilisema diagnoosimise tõttu. HSC-3 rakud on saadud primaarsest kasvajast ja on tuntud oma agressiivsete omaduste poolest, mistõttu on nad asjakohane mudel uute vähivastaste ühendite ja ravimeetodite katsetamiseks.

Mitmed uuringud on näidanud, et HSC-3 rakud läbivad apoptoosi ja autofaagiat vastusena looduslikele ühenditele ja vähivastastele ainetele. Näiteks leiti, et piperiin, musta pipra alkaloid, vähendab rakkude elujõulisust ja indutseerib apoptoosi annusest sõltuvalt. Piperiiniga töödeldud HSC-3 rakkudes täheldati apoptootiliste kehade, DNA fragmenteerumist ja proapoptootiliste valkude, nagu Bax, suurenenud ekspressiooni. Lisaks näidati, et piperiin aktiveerib nii apoptoosi kui ka autofaagiat PI3K/Akt/mTOR-signaaltee inhibeerimise kaudu, mis on vähirakkude proliferatsiooni ja ellujäämise seisukohalt kriitilise tähtsusega. Samuti on näidatud, et teised ühendid, nagu berberiin ja geniposiid, indutseerivad apoptoosi, häirides mitokondriaalse membraanipotentsiaali ja aktiveerides kaspaasirajad.

HSC-3 rakkude kasulikkus laieneb ka in vivo uuringutele, kus nende kasutamine hiirte ksenotransplantaadimudelites on näidanud kasvajate kasvu pärssimist, kui neid on ravitud looduslike ühenditega, nagu piperiin. Need rakud on usaldusväärne platvorm nii traditsiooniliste kui ka uudsete vähiravimite tõhususe hindamiseks.

Kude
Keel
Haigus
Rakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Kaelalümfisõlmede lümfisõlmede
Sünonüümid
  • HSC 3
  • HSC3

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
HSC-3 (Cytioni katalooginumber 305312)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1288

04Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homosügootne; Mutatsioon: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homosügootne: PIK3CA, p.Glu545Gly (c.1634A>G); Mutatsioon: PIK3CA, p.Glu545Gly (c.1634A>G): TERT, c.1-124C>T (c.228C>T); Mutatsioon: TP53, p.Lys305fs (c.912_913insTAAG)

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
64 aastat
Etniline kuuluvus
Jaapani