Pāriet uz saturu
Audums
Valoda
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Dzemdes kakla limfmezgls
Sinonīmi
HSC 3, HSC3

Dokumenti

HSC-3

Cell line · Preces numurs 305312

€750.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HSC-3 ir cilvēka mutes dobuma plakanšūnu karcinomas (OSCC) šūnu līnija, ko parasti izmanto mutes dobuma vēža bioloģijas izpētei, jo īpaši pētījumos, kuros galvenā uzmanība pievērsta apoptozei, šūnu cikla regulācijai un vēža ārstēšanai. Mutes dobuma plakanšūnu karcinoma ir visizplatītākais mutes dobuma vēža veids, un tā ir saistīta ar sliktu prognozi, jo tai ir augsts metastāžu potenciāls un tā tiek diagnosticēta vēlīnā stadijā. HSC-3 šūnas ir iegūtas no primāra audzēja, un tās ir pazīstamas ar savām agresīvajām īpašībām, padarot tās par piemērotu modeli jaunu pretvēža savienojumu un terapiju testēšanai.

Vairākos pētījumos ir pierādīts, ka HSC-3 šūnās notiek apoptoze un autofāgija, reaģējot uz dabīgiem savienojumiem un pretvēža līdzekļiem. Piemēram, tika konstatēts, ka melno piparu alkaloīds piperīns samazina šūnu dzīvotspēju un izraisa apoptozi atkarībā no devas. Ar piperīnu apstrādātajās HSC-3 šūnās tika novēroti apoptozes ķermeņi, DNS fragmentācija un palielināta proapoptozes proteīnu, piemēram, Bax, ekspresija. Turklāt tika pierādīts, ka piperīns aktivizē gan apoptozi, gan autofagiju, inhibējot PI3K/Akt/mTOR signalizācijas ceļu, kas ir ļoti svarīgs vēža šūnu proliferācijai un izdzīvošanai. Līdzīgi ir pierādīts, ka arī citi savienojumi, piemēram, berberīns un genipozīds, izraisa apoptozi, izjaucot mitohondriju membrānas potenciālu un aktivizējot kaspāzes ceļus.

HSC-3 šūnu lietderība ir paplašināta līdz pētījumiem in vivo, kur to izmantošana peļu ksenogrāfta modeļos ir pierādījusi audzēja augšanas inhibīciju, ja tās apstrādā ar dabīgiem savienojumiem, piemēram, piperīnu. Šīs šūnas kalpo kā stabila platforma gan tradicionālo, gan jauno vēža terapiju efektivitātes novērtēšanai.

Audums
Valoda
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Metastāžu vieta
Dzemdes kakla limfmezgls
Sinonīmi
  • HSC 3
  • HSC3

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
HSC-3 (Cytion kataloga numurs 305312)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1288

04Pazīmes un uzņēmība

Mutāciju profils
Mutācija: CDKN2A, p.Glu120Ter (c.358G>T), homozigotiska; mutācija: PIK3CA, p.Glu545Gly (c.1634A>G); mutācija: TERT, c.1-124C>T (c.228C>T); mutācija: TP53, p.Lys305fs (c.912_913insTAAG)

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamīns, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion izstrādājuma numurs 820100a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS un 1% NEAA
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
64 gadi
Etniskā piederība
Japāņu