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L-929
Gewebe
Bindegewebe, normales, subkutanes, areoläres und adipöses Gewebe
Synonyme
NCTC clone 929, NCTC 929, NCTC-929, NCTC929, L cell, L cells, L-cell, L-cells, L cell line, L, Strain L-929, L 929, L929, L929(NCTC), Clone 929, Earles's cells, Earle's L cells

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L-929

Cell line · Artikelnummer 400260

L-929-Zellen sind eine fibroblastenähnliche Zelllinie, die aus dem subkutanen Bindegewebe einer 100 Tage alten männlichen C3H/An-Maus gewonnen wurde. Sie wurde in den 1940er Jahren etabliert, …

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

L-929-Zellen sind eine fibroblastenähnliche Zelllinie, die aus dem subkutanen Bindegewebe einer 100 Tage alten männlichen C3H/An-Maus gewonnen wird. Diese Zelllinie wurde in den 1940er Jahren etabliert und ist aufgrund ihrer Robustheit, einfachen Kultivierbarkeit und vielseitigen Verwendbarkeit in verschiedenen biologischen und medizinischen Forschungsbereichen von zentraler Bedeutung.

L-929-Zellen zeichnen sich durch ihre spindelförmige, fibroblastische Morphologie und ihr adhärentes Wachstum aus. Sie werden häufig in Zytotoxizitätstests verwendet und dienen als Standardmodell zur Bewertung der Biokompatibilität von Materialien und der toxischen Auswirkungen verschiedener Substanzen, was insbesondere in den Bereichen Biomaterialien und Tissue Engineering von Bedeutung ist.

L-929-Zellen werden auch bei der Untersuchung der Zytokinaktivität eingesetzt, insbesondere bei Tests auf die Aktivität des Nekrosefaktors (TNF), da sie empfindlich auf die TNF-induzierte Zytotoxizität reagieren. Dies macht sie für die Immunologie und die Entzündungsforschung wertvoll.

L-929-Zellen werden auch in der Virologie als Wirt für Virusreplikationsstudien verwendet. Ihre Empfindlichkeit gegenüber verschiedenen Viren, wie z. B. dem Virus der infektiösen Bursenkrankheit (IBDV), erleichtert die Untersuchung der viralen Lebenszyklen, der Wirt-Virus-Interaktionen und der Wirksamkeit antiviraler Substanzen.

Insgesamt ist die L-929-Zelllinie eine wertvolle Ressource für die wissenschaftliche Forschung und bietet eine vielseitige Plattform für Studien in den Bereichen Zytotoxizität, Immunologie, Virologie und Biomaterialien.

Gewebe
Bindegewebe, normales, subkutanes, areoläres und adipöses Gewebe
Synonyme
  • NCTC clone 929
  • NCTC 929
  • NCTC-929
  • NCTC929
  • L cell
  • L cells
  • L-cell
  • L-cells
  • L cell line
  • L
  • Strain L-929
  • L 929
  • L929
  • L929(NCTC)
  • Clone 929
  • Earles's cells
  • Earle's L cells

02Klassifizierung

Organismus
Maus
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Fibroblastenähnlich
Zelltyp
Fibroblasten
Tumorauslösend
Ja, bei immunsupprimierten Mäusen
Verdopplungszeit
25 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
L-929 (Cytion-Katalognummer 400260)
NCBI-Steuer-ID
10090
Cellosaurus
CVCL_0462

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
H-2k
Viren
Ektromelie-Virus (Mauspocken): negativ
Virusresistenz
Poliovirus 1, 2, 3, Coxsackievirus B5, Polyomavirus
Reverse Transkriptase
Positiv

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
2 bis 3 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
24 bis 48 Stunden
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
C3H/An
Alter des Spenders
100 Tage