Siirry sisältöön
L-929
Kudos
Sidekudos, normaali, ihonalainen, areolaarinen ja rasvakudos
Synonyymit
NCTC clone 929, NCTC 929, NCTC-929, NCTC929, L cell, L cells, L-cell, L-cells, L cell line, L, Strain L-929, L 929, L929, L929(NCTC), Clone 929, Earles's cells, Earle's L cells

Asiakirjat

L-929

Cell line · Tuotenumero 400260

L-929-solut ovat fibroblastien kaltaisia soluja, jotka on eristetty 100 päivää vanhan uros-C3H/An-hiiren ihonalaisesta sidekudoksesta. Solulinja perustettiin 1940-luvulla, ...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

L-929-solut ovat fibroblastien kaltainen solulinja, joka on peräisin 100 päivän ikäisen C3H/An-uroshiiren ihonalaisesta sidekudoksesta. Tästä 1940-luvulla perustetusta solulinjasta on tullut keskeinen eri biologisissa ja lääketieteellisissä tutkimuksissa, koska se on kestävä, helppo viljellä ja monipuolinen sovelluksissa.

L-929-soluille on ominaista niiden spindelinmuotoinen, fibroblastinen morfologia ja tarttuva kasvu. Niitä käytetään laajalti sytotoksisuusmäärityksissä, ja ne toimivat standardimallina materiaalien biosoveltuvuuden ja erilaisten aineiden toksisten vaikutusten arvioinnissa, mikä on erityisen tärkeää biomateriaalien ja kudostekniikan aloilla.

L-929-soluja käytetään myös sytokiinien aktiivisuuden tutkimisessa, erityisesti nekroositekijän (TNF) aktiivisuuden määrityksissä, koska ne ovat herkkiä TNF:n aiheuttamalle sytotoksisuudelle. Tämä tekee niistä arvokkaita immunologian ja tulehduksen tutkimuksessa.

L-929-soluja käytetään myös virologiassa isäntänä virusten replikaatiotutkimuksissa. Niiden herkkyys erilaisille viruksille, kuten tarttuvan bursaalitaudin virukselle (IBDV), helpottaa virusten elinkaaren, isännän ja viruksen vuorovaikutuksen ja viruslääkkeiden tehon tutkimista.

Kaiken kaikkiaan L-929-solulinja on arvokas resurssi tieteellisessä tutkimuksessa ja tarjoaa monipuolisen alustan sytotoksisuuden, immunologian, virologian ja biomateriaalien tutkimuksiin.

Kudos
Sidekudos, normaali, ihonalainen, areolaarinen ja rasvakudos
Synonyymit
  • NCTC clone 929
  • NCTC 929
  • NCTC-929
  • NCTC929
  • L cell
  • L cells
  • L-cell
  • L-cells
  • L cell line
  • L
  • Strain L-929
  • L 929
  • L929
  • L929(NCTC)
  • Clone 929
  • Earles's cells
  • Earle's L cells

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Fibroblastien kaltaiset
Solutyyppi
Fibroblastit
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, immunosuppressoituneissa hiirissä
Kaksinkertaistumisaika
25 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
L-929 (Cytionin luettelonumero 400260)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_0462

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
H-2k
Virukset
Ectromelia-virus (hiiren rokko): negatiivinen
Virusten kestävyys
Poliovirus 1, 2, 3, coxsackievirus B5, polyomavirus
Käänteiskopioijaentsyymi
Positiivinen

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
24-48 tuntia
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
C3H/An
Luovuttajan ikä
100 päivää