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L-929
Tecido
Tecido conjuntivo, normal, subcutâneo, areolar e adiposo
Sinónimos
NCTC clone 929, NCTC 929, NCTC-929, NCTC929, L cell, L cells, L-cell, L-cells, L cell line, L, Strain L-929, L 929, L929, L929(NCTC), Clone 929, Earles's cells, Earle's L cells

Documentos

L-929

Cell line · Número do produto 400260

As células L-929 são uma linha celular semelhante aos fibroblastos, derivada do tecido conjuntivo subcutâneo de um rato C3H/An macho com 100 dias de idade. Criada na década de 1940, ...

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01Informações gerais

Descrição

As células L-929 são uma linha celular do tipo fibroblasto derivada do tecido conjuntivo subcutâneo de um rato C3H/An macho com 100 dias de idade. Criada na década de 1940, esta linha celular tornou-se fundamental em vários domínios da investigação biológica e médica devido à sua robustez, facilidade de cultura e versatilidade nas aplicações.

As células L-929 são caracterizadas pela sua morfologia fusiforme, fibroblástica e crescimento aderente. São amplamente utilizadas em ensaios de citotoxicidade e servem como modelo padrão para avaliar a biocompatibilidade de materiais e os efeitos tóxicos de várias substâncias, o que é particularmente relevante nos domínios dos biomateriais e da engenharia de tecidos.

As células L-929 são também utilizadas no estudo da atividade das citocinas, especialmente em ensaios de atividade do fator de necrose (TNF), devido à sua sensibilidade à citotoxicidade induzida pelo TNF. Este facto torna-as valiosas na investigação da imunologia e da inflamação.

As células L-929 são ainda utilizadas em virologia como hospedeiro para estudos de replicação viral. A sua suscetibilidade a vários vírus, como o vírus da doença infecciosa da bursa (IBDV), facilita a investigação dos ciclos de vida dos vírus, das interações vírus-hospedeiro e da eficácia dos compostos antivirais.

Globalmente, a linha celular L-929 é um recurso valioso na investigação científica e oferece uma plataforma versátil para estudos em citotoxicidade, imunologia, virologia e biomateriais.

Tecido
Tecido conjuntivo, normal, subcutâneo, areolar e adiposo
Sinónimos
  • NCTC clone 929
  • NCTC 929
  • NCTC-929
  • NCTC929
  • L cell
  • L cells
  • L-cell
  • L-cells
  • L cell line
  • L
  • Strain L-929
  • L 929
  • L929
  • L929(NCTC)
  • Clone 929
  • Earles's cells
  • Earle's L cells

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos
Tipo de célula
Fibroblastos
Tumorigénico
Sim, em ratinhos imunossuprimidos
Tempo de duplicação
25 horas

04Identificadores

Referência
L-929 (número de catálogo Cytion 400260)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0462

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
H-2k
Vírus
Vírus da ectromelia (varíola do rato): negativo
Resistência aos vírus
Poliovírus 1, 2, 3, coxsackievírus B5, poliomavírus
Transcriptase reversa
Positivo

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
2 a 3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
24 a 48 horas
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
C3H/An
Idade do dador
100 dias