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L-929
Pañuelo de papel
Tejido conjuntivo, normal, subcutáneo, areolar y adiposo
Sinónimos
NCTC clone 929, NCTC 929, NCTC-929, NCTC929, L cell, L cells, L-cell, L-cells, L cell line, L, Strain L-929, L 929, L929, L929(NCTC), Clone 929, Earles's cells, Earle's L cells

Documentos

L-929

Cell line · Número de producto 400260

Las células L-929 son una línea celular de tipo fibroblástico derivada del tejido conectivo subcutáneo de un ratón C3H/An macho de 100 días de edad. Establecida en la década de 1940, ...

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01Información general

Descripción

Las células L-929 son una línea celular de tipo fibroblasto derivada del tejido conjuntivo subcutáneo de un ratón macho C3H/An de 100 días de edad. Creada en la década de 1940, esta línea celular se ha convertido en fundamental en diversos campos de la investigación biológica y médica debido a su robustez, facilidad de cultivo y versatilidad de aplicaciones.

Las células L-929 se caracterizan por su forma fusiforme, su morfología fibroblástica y su crecimiento adherente. Se utilizan ampliamente en ensayos de citotoxicidad y sirven como modelo estándar para evaluar la biocompatibilidad de los materiales y los efectos tóxicos de diversas sustancias, lo que resulta especialmente relevante en los campos de los biomateriales y la ingeniería de tejidos.

Las células L-929 también se emplean en el estudio de la actividad de las citocinas, especialmente en ensayos de actividad del factor de necrosis (TNF), debido a su sensibilidad a la citotoxicidad inducida por el TNF. Esto las hace valiosas en la investigación de la inmunología y la inflamación.

Las células L-929 se utilizan además en virología como huésped para estudios de replicación vírica. Su susceptibilidad a diversos virus, como el virus de la bursitis infecciosa (IBDV), facilita la investigación de los ciclos vitales virales, las interacciones huésped-virus y la eficacia de los compuestos antivirales.

En general, la línea celular L-929 es un recurso valioso en la investigación científica y ofrece una plataforma versátil para estudios de citotoxicidad, inmunología, virología y biomateriales.

Pañuelo de papel
Tejido conjuntivo, normal, subcutáneo, areolar y adiposo
Sinónimos
  • NCTC clone 929
  • NCTC 929
  • NCTC-929
  • NCTC929
  • L cell
  • L cells
  • L-cell
  • L-cells
  • L cell line
  • L
  • Strain L-929
  • L 929
  • L929
  • L929(NCTC)
  • Clone 929
  • Earles's cells
  • Earle's L cells

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tipo de célula
Fibroblastos
Tumorigénico
Sí, en ratones inmunodeprimidos
Tiempo de duplicación
25 horas

04Identificadores

Referencia
L-929 (número de catálogo 400260 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0462

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de antígenos
H-2k
Virus
Virus de la ectromelia (viruela del ratón): negativo
Resistencia a los virus
Poliovirus 1, 2, 3, coxsackievirus B5, poliomavirus
Transcriptasa inversa
Positivo

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
De 2 a 3 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
de 24 a 48 horas
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
C3H/An
Edad del donante
100 días