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L-929
Tessuto
Tessuto connettivo, normale, sottocutaneo, areolare e adiposo
Sinonimi
NCTC clone 929, NCTC 929, NCTC-929, NCTC929, L cell, L cells, L-cell, L-cells, L cell line, L, Strain L-929, L 929, L929, L929(NCTC), Clone 929, Earles's cells, Earle's L cells

Documenti

L-929

Cell line · Codice prodotto 400260

Le cellule L-929 sono una linea cellulare di tipo fibroblastico derivata dal tessuto connettivo sottocutaneo di un topo maschio C3H/An di 100 giorni di età. Creata negli anni '40, ...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule L-929 sono una linea cellulare di tipo fibroblastico derivata dal tessuto connettivo sottocutaneo di un topo C3H/An maschio di 100 giorni. Fondata negli anni '40, questa linea cellulare è diventata fondamentale in vari campi della ricerca biologica e medica grazie alla sua robustezza, facilità di coltura e versatilità nelle applicazioni.

Le cellule L-929 sono caratterizzate da una morfologia fibroblastica a forma di fuso e da una crescita aderente. Sono ampiamente utilizzate nei saggi di citotossicità e servono come modello standard per valutare la biocompatibilità dei materiali e gli effetti tossici di varie sostanze, il che è particolarmente importante nei campi dei biomateriali e dell'ingegneria tissutale.

Le cellule L-929 sono impiegate anche nello studio dell'attività delle citochine, in particolare nei saggi di attività del fattore di necrosi (TNF), grazie alla loro sensibilità alla citotossicità indotta dal TNF. Ciò le rende preziose nella ricerca sull'immunologia e sull'infiammazione.

Le cellule L-929 sono inoltre utilizzate in virologia come ospite per studi sulla replicazione virale. La loro suscettibilità a vari virus, come il virus della malattia bursale infettiva (IBDV), facilita lo studio dei cicli vitali virali, delle interazioni ospite-virus e dell'efficacia dei composti antivirali.

Nel complesso, la linea cellulare L-929 è una risorsa preziosa per la ricerca scientifica e offre una piattaforma versatile per studi di citotossicità, immunologia, virologia e biomateriali.

Tessuto
Tessuto connettivo, normale, sottocutaneo, areolare e adiposo
Sinonimi
  • NCTC clone 929
  • NCTC 929
  • NCTC-929
  • NCTC929
  • L cell
  • L cells
  • L-cell
  • L-cells
  • L cell line
  • L
  • Strain L-929
  • L 929
  • L929
  • L929(NCTC)
  • Clone 929
  • Earles's cells
  • Earle's L cells

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile a un fibroblasto
Tipo di cellula
Fibroblasti
Tumorigenico
Sì, in topi immunosoppressi
Tempo di raddoppio
25 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
L-929 (numero di catalogo Cytion 400260)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0462

05Espressione e suscettibilità

Espressione dell'antigene
H-2k
Virus
Ectromelia virus (vaiolo del topo): negativo
Resistenza ai virus
Poliovirus 1, 2, 3, coxsackievirus B5, polyomavirus
Trascriptasi inversa
Positivo

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L di glucosio, w: 2,5 mM di L-Glutammina, w: 15 mM di HEPES, w: 0,5 mM di Sodio piruvato, w: 1,2 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820400a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Da 2 a 3 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
da 24 a 48 ore
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
C3H/An
Età dei donatori
100 giorni