Pāriet uz saturu
L-929
Audums
Saistaudi, normāli, zemādas, areolārie un taukaudi
Sinonīmi
NCTC clone 929, NCTC 929, NCTC-929, NCTC929, L cell, L cells, L-cell, L-cells, L cell line, L, Strain L-929, L 929, L929, L929(NCTC), Clone 929, Earles's cells, Earle's L cells

Dokumenti

L-929

Cell line · Preces numurs 400260

L-929 šūnas ir fibroblastveidīga šūnu līnija, kas iegūta no 100 dienas veca C3H/An vīriešu peles zemādas saistauda. Izveidota 1940. gados, ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

L-929 šūnas ir fibroblastiem līdzīga šūnu līnija, kas iegūta no 100 dienas vecu C3H/An peļu tēviņu zemādas saistaudiem. Šī šūnu līnija, kas radīta pagājušā gadsimta 40. gados, ir kļuvusi ļoti svarīga dažādās bioloģijas un medicīnas pētniecības jomās, jo ir izturīga, viegli kultivējama un daudzpusīgi izmantojama.

L-929 šūnām ir raksturīga vārpstas forma, fibroblastiska morfoloģija un adherenta augšana. Tās plaši izmanto citotoksicitātes testos un kalpo kā standarta modelis, lai novērtētu materiālu biosaderību un dažādu vielu toksisko iedarbību, kas ir īpaši svarīgi biomateriālu un audu inženierijas jomā.

L-929 šūnas izmanto arī citokīnu aktivitātes pētījumos, jo īpaši nekrozes faktora (TNF) aktivitātes noteikšanā, jo tās ir jutīgas pret TNF izraisītu citotoksicitāti. Tas padara tās vērtīgas imunoloģijā un iekaisumu pētījumos.

L-929 šūnas izmanto arī virusoloģijā kā saimniekorganismu vīrusu replikācijas pētījumos. To uzņēmība pret dažādiem vīrusiem, piemēram, infekciozās bursālās slimības vīrusu (IBDV), atvieglo vīrusu dzīves ciklu, saimnieka un vīrusa mijiedarbības un pretvīrusu savienojumu efektivitātes izpēti.

Kopumā L-929 šūnu līnija ir vērtīgs resurss zinātniskajos pētījumos un piedāvā daudzpusīgu platformu citotoksicitātes, imunoloģijas, virusoloģijas un biomateriālu pētījumiem.

Audums
Saistaudi, normāli, zemādas, areolārie un taukaudi
Sinonīmi
  • NCTC clone 929
  • NCTC 929
  • NCTC-929
  • NCTC929
  • L cell
  • L cells
  • L-cell
  • L-cells
  • L cell line
  • L
  • Strain L-929
  • L 929
  • L929
  • L929(NCTC)
  • Clone 929
  • Earles's cells
  • Earle's L cells

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti
Tumorogēns
Jā, imunosupresētām pelēm
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
25 stundas

04Identifikatori

Atsauce
L-929 (Cytion kataloga numurs 400260)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0462

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
H-2k
Vīrusi
Ektromēlijas vīruss (peļu bakas): negatīvs
Izturība pret vīrusiem
Poliovīruss 1, 2, 3, koksackie vīruss B5, poliomavīruss
Reversā transkriptāze
Pozitīvs

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
2 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
24 līdz 48 stundas
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
C3H/An
Donora vecums
100 dienas