Mine otse sisu juurde
L-929
Kude
Sidekude, normaalne, nahaalune, areolaarne ja rasvkude
Sünonüümid
NCTC clone 929, NCTC 929, NCTC-929, NCTC929, L cell, L cells, L-cell, L-cells, L cell line, L, Strain L-929, L 929, L929, L929(NCTC), Clone 929, Earles's cells, Earle's L cells

Dokumendid

L-929

Cell line · Toote number 400260

L-929 rakud on fibroblastidele sarnane rakuliin, mis on saadud 100-päevase isas-C3H/An hiire nahaaluse sidekoe rakkudest. See loodi 1940. aastatel, ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

L-929 rakud on fibroblastilaadne rakuliin, mis on saadud 100 päeva vanuse isase C3H/An hiire nahaalusest sidekoes. See 1940. aastatel loodud rakuliin on tänu oma vastupidavusele, hõlpsale kasvatamisele ja mitmekülgsele kasutusvõimalusele muutunud oluliseks erinevates bioloogilistes ja meditsiinilistes uurimisvaldkondades.

L-929 rakke iseloomustab nende spindlikujuline, fibroblastiline morfoloogia ja kleepuv kasv. Neid kasutatakse laialdaselt tsütotoksilisuse katsetes ja nad on standardmudeliks materjalide bioloogilise kokkusobivuse ja erinevate ainete toksilise mõju hindamisel, mis on eriti oluline biomaterjalide ja koetehnoloogia valdkonnas.

L-929 rakke kasutatakse ka tsütokiinide aktiivsuse uurimisel, eriti nekroosifaktori (TNF) aktiivsuse määramisel, kuna nad on tundlikud TNF-indutseeritud tsütotoksilisuse suhtes. See muudab nad väärtuslikuks immunoloogia ja põletiku uurimisel.

L-929 rakke kasutatakse ka viroloogias viiruste replikatsiooniuuringute peremeheks. Nende tundlikkus erinevate viiruste, näiteks nakkusliku bursaalse haiguse viiruse (IBDV) suhtes hõlbustab viiruse elutsüklite, peremees-viiruse interaktsioonide ja viirusevastaste ühendite tõhususe uurimist.

Üldiselt on L-929 rakuliin väärtuslik ressurss teaduslikes uuringutes ja pakub mitmekülgset platvormi tsütotoksilisuse, immunoloogia, viroloogia ja biomaterjalide uuringuteks.

Kude
Sidekude, normaalne, nahaalune, areolaarne ja rasvkude
Sünonüümid
  • NCTC clone 929
  • NCTC 929
  • NCTC-929
  • NCTC929
  • L cell
  • L cells
  • L-cell
  • L-cells
  • L cell line
  • L
  • Strain L-929
  • L 929
  • L929
  • L929(NCTC)
  • Clone 929
  • Earles's cells
  • Earle's L cells

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Fibroblastilaadsed
Rakutüüp
Fibroblastide
Tuumorigeenne
Jah, immuunsupressiooniga hiirtel
Kahekordistumisaeg
25 tundi

04Tunnused

Viide
L-929 (Cytioni katalooginumber 400260)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0462

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
H-2k
Viirused
Ektromelia viirus (hiireviirus): negatiivne
Viirusresistentsus
Polioviirus 1, 2, 3, kooksackieviirus B5, polüomaviirus
Pöördtranskriptaas
Positiivne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
24 kuni 48 tundi
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
C3H/An
Doonori vanus
100 päeva