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HCC94
Pañuelo de papel
Cérvix
Enfermedad
Carcinoma de células escamosas
Sinónimos
HCC-94, HCC 94, HCC941122

Documentos

HCC94

Cell line · Número de producto 305462

La línea celular HCC94 es un modelo que se utiliza para estudiar el cáncer de cuello uterino, una enfermedad que suele estar relacionada con la infección por el virus del papiloma humano (VPH). Esta línea celular tiene...

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Personalización / Recomendaciones

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01Información general

Descripción

La línea celular HCC94 es un modelo utilizado para estudiar el cáncer de cuello uterino, una enfermedad que suele estar relacionada con la infección por el virus del papiloma humano (VPH). Esta línea celular ha sido fundamental para comprender los mecanismos que subyacen a la resistencia a la quimioterapia, especialmente a través de las vías metabólicas. Estudios recientes han demostrado que, en las células madre del cáncer de cuello uterino (CSC) derivadas de la línea HCC94, las enzimas implicadas en el metabolismo del glucógeno, como la PCK1 y la glucógeno fosforilasa fosforilada (pPYGL), facilitan la degradación del glucógeno. Este proceso dirige la glucosa hacia la vía de las pentosas fosfato (PPP), produciendo NADPH y contribuyendo a la eliminación de las especies reactivas de oxígeno (ROS). Este mecanismo contribuye a la supervivencia de la célula bajo quimioterapia, lo que fomenta la resistencia.

Investigaciones posteriores han demostrado que la inhibición de la PCK1 en las CSC de HCC94 puede reducir la producción de NADPH y mermar la capacidad de las células para eliminar las ROS, lo que aumenta su sensibilidad a la quimioterapia. Estos hallazgos subrayan el potencial de actuar sobre vías metabólicas como la PPP y la degradación del glucógeno como estrategias para superar la resistencia a los fármacos en el cáncer de cuello uterino. Este conocimiento podría allanar el camino para nuevos enfoques terapéuticos destinados a alterar los mecanismos de gestión de las ROS con el fin de mejorar los resultados del tratamiento del cáncer de cuello uterino.

Pañuelo de papel
Cérvix
Enfermedad
Carcinoma de células escamosas
Sinónimos
  • HCC-94
  • HCC 94
  • HCC941122

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Identificadores

Referencia
HCC94 (número de catálogo de Cytion 305462)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6945

04Expresión y susceptibilidad

Virus
Transformante: virus del papiloma humano tipo 16 (VPH16)

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1-3*10^4/cm²
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

07Donante

Edad del donante
37 años