Pāriet uz saturu
HCC94
Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
HCC-94, HCC 94, HCC941122

Dokumenti

HCC94

Cell line · Preces numurs 305462

Šūnu līnija HCC94 ir modelis, ko izmanto dzemdes kakla vēža pētīšanai — slimībai, kas bieži saistīta ar cilvēka papilomas vīrusa (HPV) infekciju. Šai šūnu līnijai piemīt ...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HCC94 šūnu līnija ir modelis, ko izmanto dzemdes kakla vēža pētīšanai — slimībai, kas bieži saistīta ar cilvēka papilomas vīrusa (HPV) infekciju. Šī šūnu līnija ir bijusi izšķiroša, lai izprastu mehānismus, kas ir pamatā rezistencei pret ķīmijterapiju, jo īpaši saistībā ar vielmaiņas ceļiem. Nesenie pētījumi liecina, ka no HCC94 iegūtajās dzemdes kakla vēža cilmes šūnās (CSC) glikogēna vielmaiņā iesaistītie fermenti, piemēram, PCK1 un fosforilētā glikogēna fosforilāze (pPYGL), veicina glikogēna sadalīšanos. Šis process novirza glikozes plūsmu uz pentozes fosfāta ceļu (PPP), ražojot NADPH un veicinot reaktīvo skābekļa savienojumu (ROS) izvadīšanu. Šis mehānisms veicina šūnu izdzīvošanu ķīmijterapijas apstākļos, tādējādi sekmējot rezistenci.

Turpmākie pētījumi ir parādījuši, ka PCK1 ekspresijas nomākšana HCC94 CSC var samazināt NADPH ražošanu un traucēt šūnu spēju izvadīt ROS, tādējādi palielinot to jutību pret ķīmijterapiju. Šie atklājumi uzsver iespēju mērķtiecīgi ietekmēt vielmaiņas ceļus, piemēram, PPP un glikogēna sadalīšanos, kā stratēģijas, lai pārvarētu zāļu rezistenci dzemdes kakla vēža gadījumā. Šī izpratne var pavērt ceļu jaunām terapeitiskām pieejām, kuru mērķis ir traucēt ROS regulēšanas mehānismus, lai uzlabotu ārstēšanas rezultātus dzemdes kakla vēža gadījumā.

Audums
Dzemdes kakls
Slimība
Plakanšūnu karcinoma
Sinonīmi
  • HCC-94
  • HCC 94
  • HCC941122

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
HCC94 (Cytion kataloga numurs 305462)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_6945

04Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Transformants: cilvēka papilomas vīruss 16. tipa (HPV16)

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1–3 × 10⁴/cm²
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
37 gadi