Mine otse sisu juurde
HCC94
Kude
Emakakael
Haigus
Rakk-kartsinoom
Sünonüümid
HCC-94, HCC 94, HCC941122

Dokumendid

HCC94

Cell line · Toote number 305462

Rakuliin HCC94 on mudel, mida kasutatakse emakakaelavähi uurimiseks – see haigus on sageli seotud inimese papilloomiviiruse (HPV) nakkusega. Sellel rakuliinil on ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HCC94 rakuliin on mudel, mida kasutatakse emakakaelavähi uurimiseks – see haigus on sageli seotud inimese papilloomiviiruse (HPV) nakkusega. See rakuliin on olnud oluline kemoteraapiaresistentsuse aluseks olevate mehhanismide mõistmisel, eelkõige ainevahetusradade kaudu. Hiljutised uuringud on näidanud, et HCC94-st saadud emakakaelavähi tüvirakkudes (CSC-d) hõlbustavad glükogeeni ainevahetuses osalevad ensüümid, nagu PCK1 ja fosforüülitud glükogeeni fosforülaas (pPYGL), glükogeeni lagundamist. See protsess suunab glükoosi pentoosfosfaadi rada (PPP) kaudu, tootes NADPH-d ja aidates kaasa reaktiivsete hapnikuliikide (ROS) eemaldamisele. See mehhanism aitab kaasa raku ellujäämisele kemoteraapia ajal, soodustades seeläbi resistentsust.

Edasised uuringud on näidanud, et PCK1-i ekspressiooni pärssimine HCC94 emakakaelavähi tüvirakkudes võib vähendada NADPH-i tootmist ja halvendada rakkude võimet eemaldada ROS-e, suurendades seeläbi nende tundlikkust kemoteraapia suhtes. Need leiud rõhutavad selliste ainevahetusradade nagu PPP ja glükogeeni lagundamine sihtmärgistamise potentsiaali strateegiatena ravimresistentsuse ületamiseks emakakaelavähi puhul. See arusaam võib sillutada teed uutele ravivõtetele, mille eesmärk on häirida ROS-i reguleerimismehhanisme, et parandada emakakaelavähi ravi tulemusi.

Kude
Emakakael
Haigus
Rakk-kartsinoom
Sünonüümid
  • HCC-94
  • HCC 94
  • HCC941122

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
HCC94 (Cytioni katalooginumber 305462)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_6945

04Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Transformant: inimese papilloomiviirus tüüp 16 (HPV16)

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
1–3 × 10⁴/cm²
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
37 aastat