Preskoči na vsebino
HCC94
Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Ploščatocelični karcinom
Sinonimi
HCC-94, HCC 94, HCC941122

Dokumenti

HCC94

Cell line · Številka izdelka 305462

Celična linija HCC94 je model, ki se uporablja za preučevanje raka materničnega vratu, bolezni, ki je pogosto povezana z okužbo s humanim papilomavirusom (HPV). Ta celična linija ima ...

€550.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija HCC94 je model, ki se uporablja za preučevanje raka materničnega vratu, bolezni, ki je pogosto povezana z okužbo s humanim papilomavirusom (HPV). Ta celična linija je imela ključno vlogo pri razumevanju mehanizmov, na katerih temelji odpornost proti kemoterapiji, zlasti prek presnovnih poti. Nedavne študije so pokazale, da v matičnih celicah raka materničnega vratu (CSC), pridobljenih iz linije HCC94, encimi, vključeni v presnovo glikogena, kot sta PCK1 in fosforilirana glikogen fosforilaza (pPYGL), pospešujejo razgradnjo glikogena. Ta proces usmerja glukozo v pentozno-fosfatno pot (PPP), pri čemer nastaja NADPH in se pospešuje odstranjevanje reaktivnih kisikovih spojin (ROS). Ta mehanizem prispeva k preživetju celic med kemoterapijo, s čimer spodbuja odpornost.

Nadaljnje raziskave so pokazale, da lahko zmanjšanje izražanja PCK1 v CSC linije HCC94 zmanjša proizvodnjo NADPH in oslabi sposobnost celic za odstranjevanje ROS, s čimer se poveča njihova občutljivost na kemoterapijo. Ti izsledki poudarjajo potencial usmerjanja v presnovne poti, kot sta PPP in razgradnja glikogena, kot strategije za premagovanje odpornosti na zdravila pri raku materničnega vratu. To spoznanje lahko utre pot novim terapevtskim pristopom, usmerjenim v motenje mehanizmov uravnavanja ROS, s čimer bi izboljšali rezultate zdravljenja raka materničnega vratu.

Tkivo
Maternični vrat
Bolezen
Ploščatocelični karcinom
Sinonimi
  • HCC-94
  • HCC 94
  • HCC941122

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Identifikatorji

Navajanje vira
HCC94 (kataloška številka Cytion 305462)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6945

04Izražanje in dovzetnost

Virusi
Transformant: človeški papilomavirus tipa 16 (HPV16)

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1–3 × 10⁴/cm²
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
37 let