Gå til innholdet
HCC94
Vev
Livmorhalsen
Sykdom
Plateepitelkarsinom
Synonymer
HCC-94, HCC 94, HCC941122

Dokumenter

HCC94

Cell line · Produktnummer 305462

HCC94-cellelinjen er en modell som brukes til å studere livmorhalskreft, en sykdom som ofte er knyttet til infeksjon med humant papillomavirus (HPV). Denne cellelinjen har ...

€550.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HCC94-cellelinjen er en modell som brukes til å studere livmorhalskreft, en sykdom som ofte knyttes til infeksjon med humant papillomavirus (HPV). Denne cellelinjen har vært avgjørende for å forstå mekanismene som ligger til grunn for resistens mot cellegift, særlig gjennom metabolske veier. Nyere studier har vist at i livmorhalskreftstamceller (CSC-er) avledet fra HCC94, bidrar enzymer involvert i glykogenmetabolismen, slik som PCK1 og fosforylert glykogenfosforylase (pPYGL), til nedbrytningen av glykogen. Denne prosessen leder glukose inn i pentosefosfatveien (PPP), hvor det produseres NADPH og bidrar til fjerning av reaktive oksygenarter (ROS). Denne mekanismen bidrar til cellens overlevelse under cellegiftbehandling og fremmer dermed resistens.

Ytterligere forskning har vist at nedregulering av PCK1 i HCC94-CSC-er kan redusere NADPH-produksjonen og svekke cellenes evne til å fjerne ROS, noe som øker deres følsomhet overfor cellegift. Disse funnene understreker potensialet i å målrette metabolske veier som PPP og nedbrytning av glykogen som strategier for å overvinne medikamentresistens ved livmorhalskreft. Denne forståelsen kan bane vei for nye terapeutiske tilnærminger som tar sikte på å forstyrre mekanismene for håndtering av ROS for å forbedre behandlingsresultatene ved livmorhalskreft.

Vev
Livmorhalsen
Sykdom
Plateepitelkarsinom
Synonymer
  • HCC-94
  • HCC 94
  • HCC941122

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Identifikatorer

Kildehenvisning
HCC94 (Cytion-katalognummer 305462)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6945

04Uttrykk og mottakelighet

Virus
Transformant: Humant papillomavirus type 16 (HPV16)

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1–3 × 10⁴/cm²
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
37 år