Ga naar de inhoud
HCC94
Weefsel
Baarmoederhals
Ziekte
Plaveiselcelcarcinoom
Synoniemen
HCC-94, HCC 94, HCC941122

Documenten

HCC94

Cell line · Productnummer 305462

De HCC94-cellijn is een model dat wordt gebruikt voor onderzoek naar baarmoederhalskanker, een aandoening die vaak in verband wordt gebracht met een infectie met het humaan papillomavirus (HPV). Deze cellijn heeft ...

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HCC94-cellijn is een model dat wordt gebruikt voor onderzoek naar baarmoederhalskanker, een aandoening die vaak in verband wordt gebracht met een infectie met het humaan papillomavirus (HPV). Deze cellijn heeft een cruciale rol gespeeld bij het verkrijgen van inzicht in de mechanismen die ten grondslag liggen aan resistentie tegen chemotherapie, met name via metabolische routes. Recente studies hebben aangetoond dat in baarmoederhalskankerstamcellen (CSC's) afkomstig van HCC94, enzymen die betrokken zijn bij het glycogeenmetabolisme, zoals PCK1 en gefosforyleerd glycogeenfosforylase (pPYGL), de afbraak van glycogeen bevorderen. Dit proces leidt glucose naar de pentosefosfaatroute (PPP), waardoor NADPH wordt geproduceerd en de afvoer van reactieve zuurstofsoorten (ROS) wordt bevorderd. Dit mechanisme draagt bij aan het overleven van de cel tijdens chemotherapie, waardoor resistentie wordt bevorderd.

Verder onderzoek heeft aangetoond dat het uitschakelen van PCK1 in HCC94-CSC’s de NADPH-productie kan verminderen en het vermogen van de cellen om ROS af te voeren kan aantasten, waardoor hun gevoeligheid voor chemotherapie toeneemt. Deze bevindingen onderstrepen het potentieel van het richten op metabolische routes zoals de PPP en de afbraak van glycogeen als strategieën om resistentie tegen geneesmiddelen bij baarmoederhalskanker te overwinnen. Dit inzicht kan de weg vrijmaken voor nieuwe therapeutische benaderingen die gericht zijn op het verstoren van mechanismen voor het beheer van ROS, om zo de behandelingsresultaten bij baarmoederhalskanker te verbeteren.

Weefsel
Baarmoederhals
Ziekte
Plaveiselcelcarcinoom
Synoniemen
  • HCC-94
  • HCC 94
  • HCC941122

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Identificatiegegevens

Bronvermelding
HCC94 (Cytion-catalogusnummer 305462)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6945

04Expressie en vatbaarheid

Virussen
Transformant: humaan papillomavirus type 16 (HPV16)

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
1-3*10⁴/cm²
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
37 jaar