Przejdź do treści
HCC94
Chusteczka
Szyjka macicy
Choroba
Rak płaskonabłonkowy
Synonimy
HCC-94, HCC 94, HCC941122

Dokumenty

HCC94

Cell line · Numer produktu 305462

Linia komórkowa HCC94 stanowi model wykorzystywany do badań nad rakiem szyjki macicy, chorobą często powiązaną z zakażeniem wirusem brodawczaka ludzkiego (HPV). Linia ta posiada...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HCC94 stanowi model wykorzystywany do badań nad rakiem szyjki macicy, schorzeniem często powiązanym z zakażeniem wirusem brodawczaka ludzkiego (HPV). Linia ta odegrała kluczową rolę w zrozumieniu mechanizmów leżących u podstaw oporności na chemioterapię, zwłaszcza w kontekście szlaków metabolicznych. Najnowsze badania wykazały, że w komórkach macierzystych raka szyjki macicy (CSC) pochodzących z linii HCC94 enzymy biorące udział w metabolizmie glikogenu, takie jak PCK1 i fosforylowana fosforylaza glikogenowa (pPYGL), ułatwiają rozkład glikogenu. Proces ten kieruje glukozę do szlaku pentozowo-fosforanowego (PPP), co prowadzi do wytwarzania NADPH i wspomaga usuwanie reaktywnych form tlenu (ROS). Mechanizm ten przyczynia się do przeżycia komórek w trakcie chemioterapii, sprzyjając w ten sposób oporności.

Dalsze badania wykazały, że wyciszenie ekspresji PCK1 w komórkach macierzystych raka szyjki macicy (CSC) pochodzących z linii HCC94 może zmniejszyć produkcję NADPH i osłabić zdolność komórek do usuwania ROS, zwiększając ich wrażliwość na chemioterapię. Odkrycia te podkreślają potencjał ukierunkowania działań na szlaki metaboliczne, takie jak szlak pentozowo-fosforanowy (PPP) i rozkład glikogenu, jako strategii przezwyciężania oporności na leki w raku szyjki macicy. Ta wiedza może utorować drogę dla nowych podejść terapeutycznych mających na celu zakłócenie mechanizmów regulacji ROS w celu poprawy wyników leczenia raka szyjki macicy.

Chusteczka
Szyjka macicy
Choroba
Rak płaskonabłonkowy
Synonimy
  • HCC-94
  • HCC 94
  • HCC941122

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
HCC94 (numer katalogowy Cytion 305462)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6945

04Ekspresja i podatność

Wirusy
Transformant: wirus brodawczaka ludzkiego typu 16 (HPV16)

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1–3 × 10⁴/cm²
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
37 lat