HK-2xZFN-mEGFP-Nup107

La línea celular HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 es una variante modificada genéticamente de la línea celular Hela Kyoto, derivada de células humanas de cáncer de cuello de útero. Esta línea celular se ha modificado utilizando la tecnología de la nucleasa de dedo de zinc (ZFN) para integrar la proteína verde fluorescente monomérica mejorada (mEGFP) en el gen Nup107, un componente crucial del complejo de poro nuclear (CPN). Nup107 desempeña un papel clave en el transporte nucleocitoplasmático, esencial para la homeostasis celular y la regulación génica.

La integración de mEGFP permite la visualización y el seguimiento de Nup107, facilitando los estudios sobre la dinámica y las funciones del CNP. Este marcaje fluorescente ayuda a comprender la distribución espacial y temporal de Nup107 y sus interacciones con otras nucleoporinas y factores de transporte. La línea celular HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 es muy valiosa para investigar los mecanismos de transporte celular y la fisiopatología de las enfermedades.

Esta línea celular proporciona un modelo robusto para estudiar el intrincado funcionamiento del CNP y sus implicaciones en la salud y la enfermedad, combinando la estabilidad genética y el origen humano de las células Hela Kyoto con la ingeniería genética avanzada.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía