Gå til innholdet
HK-2xZFN-mEGFP-Nup107
Vev
Endocervix
Sykdom
Adenokarsinom
Metastaseområde
Primær tumorlokalisering (endocervix)

Dokumenter

HK-2xZFN-mEGFP-Nup107

Cell line · Produktnummer 300676

Cellelinjen HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 er en genetisk modifisert variant av cellelinjen Hela Kyoto, som stammer fra humane livmorhalskreftceller. Denne cellelinjen...

€800.00ekskl. mva. og frakt
Lite på lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HK-2xZFN-mEGFP-Nup107-cellelinjen er en genmodifisert variant av Hela Kyoto-cellelinjen, som er avledet fra humane livmorhalskreftceller. Denne cellelinjen er modifisert ved hjelp av sinkfingernuklease (ZFN)-teknologi for å integrere monomert Enhanced Green Fluorescent Protein (mEGFP) i Nup107-genet, en viktig komponent i kjerneporkomplekset (NPC). Nup107 spiller en nøkkelrolle i nukleocytoplasmatisk transport, som er avgjørende for cellulær homeostase og genregulering.

Integrasjonen av mEGFP muliggjør visualisering og sporing av Nup107, noe som forenkler studier av NPCs dynamikk og funksjoner. Denne fluorescerende merkingen bidrar til å forstå Nup107s romlige og tidsmessige distribusjon og dens interaksjoner med andre nukleoporiner og transportfaktorer. HK-2xZFN-mEGFP-Nup107-cellelinjen er uvurderlig for forskning på cellulære transportmekanismer og sykdomspatofysiologi.

Denne cellelinjen er en robust modell for å studere NPCs intrikate virkemåte og dens konsekvenser for helse og sykdom, og den kombinerer Hela Kyoto-cellenes genetiske stabilitet og menneskelige opprinnelse med avansert genteknologi.

Vev
Endocervix
Sykdom
Adenokarsinom
Metastaseområde
Primær tumorlokalisering (endocervix)
Søknader
Biologi knyttet til kjerneporekomplekset (NPC); avbildning av Nup107/Y-komplekset; transport mellom kjernen og cytoplasmaet; visualisering av levende celler med mEGFP; dynamikken i NPC; validering av ZFN-genomredigering

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a ZFN-integrated mEGFP fusion at the Nup107 locus enabling nuclear pore complex imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende celler med mosaikksteinform
Celletype
Epitelceller

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HK-2xZFN-mEGFP-Nup107 (Cytion katalognummer 300676)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_VL12
Innskjærer
Ellenberg-laboratoriet (EMBL)

05Uttrykk og mottakelighet

Produkter
EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein) Nup107

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
30 år
Etnisitet
Afroamerikaner